培養内皮細胞におけるCa＾＜2＋＞動態からみた揮発性麻酔薬によるNO産生阻害機構の検討

从培养内皮细胞Ca^2+动力学角度研究挥发性麻醉药抑制NO产生的机制

• 批准号: 07671681
• 负责人: 弘中 康雄
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07671681/
• 关键词: 血管内皮細胞; 細胞内カルシウムイオン; Fura2; AM; 小胞体; 揮発性麻酔薬

血管の内皮細胞においてアゴニストの受容体刺激は細胞内Ca^<2+>濃度を上昇させ、nitric oxide(NO)を産生し、平滑筋細胞のcyclicGMP系を介して血管弛緩を引き起こす。揮発性麻酔薬はこのNO-cyclicGMP系を介する内皮依存性弛緩を抑制する。本研究は揮発性麻酔薬が内皮細胞のCa^<2+>濃度上昇を抑制する事によってNO産生低下を将来するという作業仮説を培養細胞を用いて証明することである。本実験では昨年度ウシ大動脈内皮細胞を継続培養できるようになり、fura-2/AMにてインキュベーションしアゴニストとしてブラジキニンの投与により内皮細胞内Ca^<2+>濃度の一過性の上昇を測定できるようになった。(1)本年度はブラジキニンの一過性の上昇の後のプラトーフェーズが最初の基線に比べて上昇しておりプラトーフェーズでも内皮細胞内Ca^<2+>濃度の上昇していることがわかった。(2)さらにカルシウム除去溶液中では、ブラジキニンを暴露させた場合一過性の内皮細胞内Ca^<2+>濃度の上昇は認めたが、プラトーフェーズは最初の基線まで減少した。(3)次にハロセン(0.5%ないし2.0%)あるいはイソフルラン(1.0%ないし2.0%)の単独暴露により、内皮細胞内Ca^<2+>濃度は明らかな変化を示さないことがわかった。(4)ハロセンの暴露は、ハロセンの濃度依存性にブラジキニンの一過性の内皮細胞内Ca^<2+>濃度の増加を減少させた。しかしイソフルランの暴露はイソフルラン濃度を増加させてもブラジキニンの内皮細胞Ca^<2+>濃度の増加には影響を与えないことがわかった。異常の結果から、アゴニスト刺激によるNO-cyclicGMP系を介した内皮依存性弛緩に対し、揮発性麻酔薬は内皮依存性のCa^<2+>濃度に影響していることが判明した。

Vascular endothelial cells are stimulated by receptors and the intracellular Ca^<2+> concentration is increased. Oxide (NO) is produced, smooth muscle cells and the cyclic GMP system is responsible for the relaxation of blood vessels and the activation of blood vessels. Volatile anesthesia is a NO-cyclic GMP system that inhibits endothelium-dependent relaxation. This study shows that the increase in Ca^<2+> concentration in endothelial cells of volatile anesthesia is inhibited. Low NO production will be demonstrated in the future by cultivating cells and proving it. The last year's aortic endothelial cell culture system, Fura-2/AM にてインキュベーションしアMeasurement of transient increase in Ca^<2+> concentration in endothelial cells after administration of ゴニストとしてブラジキニンの. (1) The initial baseline of the current year's はブラジキニンの after a transient rise is higher than the べてThe concentration of Ca^<2+> in endothelial cells has increased. (2) Remove the transient endothelial cells in the solution when the さらにカシウム is exposed to では and ブラジキニンをAn increase in the intracellular Ca^<2+> concentration is recognized as a result, and a decrease in the initial baseline of the intracellular Ca^<2+> concentration is detected. (3)にハロセン(0.5%ないし2.0%)あるいはイソフルラン(1.0%ないし2.0%) ) of single exposure, the concentration of Ca^<2+> in endothelial cells has not changed. (4) Concentration dependence of exposure and concentration dependence of fluorescein is a transient increase in Ca^<2+> concentration in endothelial cells and a decrease in concentration.しかしイソフルランのexposureはイソフルランconcentrationをincreasedさせてもブラジキニンThe increase in Ca^<2+> concentration in endothelial cells has an impact on the relationship between Ca^<2+> and endothelial cells. Abnormal result, アゴニストstimulation, NO-cyclicGMP system, endothelium-dependent relaxation It has been clarified that the influence of Ca^<2+> concentration on endothelial dependence of mild and volatile anesthesia is clear.