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遺伝子プロモーター領域における三重鎖DNA形成による転写反応制御

基因启动子区域三链 DNA 形成对转录反应的调控

基本信息

批准号：
07680674
负责人：
木山亮一
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究ではポリプリン・ポリピリミジン配列を用いた三重鎖DNA形成によってその近傍に存在する遺伝子の転写活性を調べる事を目的とし、本年度は上流にポリ(dA)・ポリ(dT)配列が存在するヒト・ε-グロビン遺伝子についてin vitroで三重鎖形成による転写反応の影響を検討した。その結果、この配列をプロモーター下流においたときに著しい転写反応の阻害がみられたため、その阻害のメカニズムについてさらに検討を重ねた。具体的な手法としては、核抽出液より得たin vitro転写系を用い、さまざまな組み換え体を鋳型として転写実験を行った。一方、この観察が一般的に見られるかどうか検証するため、さまざまな遺伝子プロモーターの下流に三重鎖形成可能な配列を置き、転写反応の阻害もあわせて調べた。その結果、転写反応を開始させた時、外から三番目の鎖を供給しなくても反応阻害がみられることが解かった。阻害のkineticsについての結果も総合し検討した結果、転写反応産物による阻害が起きたものと結論した。この結果はin vivoで三重鎖形成配列が存在するとそれを含むDNAが不安定になり、脱落しやすくなるという現象もよく説明でき、今までメカニズムの不明だったこの現象を説明する重要な知見として本年度論文(1996年)として発表した。この阻害の分子機構についてさらに詳しく調べる予定である。

In this study, we aimed to investigate the effects of the up-stream (dA)-(dT) alignment on the formation of triple-lock DNA in vitro, and to investigate the effects of triple-lock DNA in vitro. As a result, the list of the most important items in the list is: The specific method is to extract the solution from the vitro, to use the solution in the vitro, and to change the form of the solution. A common observation is that triple locks may be formed in the downstream of the pipeline, and the resistance of the pipeline may be adjusted. The result is that when you start writing, and you start writing. The results of resistance kinetics are summarized in the results of investigation, and the results of reaction products are summarized in the results of investigation. This result explains the existence of triple lock formation in vivo, including the phenomenon of DNA instability and shedding, and the important insight into the phenomenon of unknown DNA fragmentation today, which was reported in this year's paper (1996). The molecular mechanism of this kind of resistance is detailed and predetermined.