DNAマイクロアレイを用いた植物エストロゲンの作用メカニズムの解明

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内分泌撹乱物質としては、植物エストロゲンなど白然界に存在する物質や合成化合物が存在して、ヒトに対してホルモンに似た作用を示す。本研究の目的は、トキシコゲノム分野において有力な手法のひとつであるDNAマイクロァレイ法を用いて植物エストロゲンや合成化合物の中からエストロゲン活性を有する物質を探索し、さらに、それらをマーカーとして用いて、未知の化合物やエストロゲン活性評価がされていない化合物について遺伝子レベルでの解析を行うことにある。本研究では、catechin類、フタル酸エステル類、及び、Zearalenone類について解析を行った。まず、DNAマイクロアレイ実験を行うための化合物の濃度条件(EC50)をSRBアッセイにより決定した。カテキン類に関してはいずれも細胞増殖活性は認められなかったが、9個のフタル酸エステル(及びフタル酸塩)についてSRBを行ったところ、いくつかの化合物は強い細胞増殖活性を示した。これらの化合物についてDNAマイクロアレイ解析を行ない、得られた遺伝子発現プロファイルをそれぞれの化合物の間で比較した。化合物間の比較は、統計的な相関解析を用いて行い、結果はエストロゲンに対する相関係数で表示した。さらに、DNAマイクロアレイ解析に用いた遺伝子の機能による解析も行った。GenBankデータベースのアノテーションによって6つの機能グループにまとめて相関解析を行ったところ、化合物の間でそれぞれ異なる機能グループの遺伝子について異なる応答が見られた。これらの相違は化合物の性質を分けるのに有用であると考えられる。さらに、Zearalenone類についてもDNAマイクロアレイ解析を行ったところ、いずれの化合物もエストロゲンに対して非常に高い相関を示した。以上の結果、DNAマイクロアレイ解析は様々な化合物に適用でき、エストロゲン活性の評価に有効であることが分った。