イネのグルタミン酸合成酵素群の窒素代謝における役割の解明

阐明水稻谷氨酸合酶组在氮代谢中的作用

• 批准号: 07760058
• 负责人: 早川 俊彦
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760058/
• 关键词: イネ; 窒素転流; NADH依存性グルタミン酸合成酵素; フェレドキシン依存性グルタミン酸合成酵素

1 イネNADH依存性グルタミン酸合成酵素(NADH-GOGAT)遺伝子の単離イネ根NADH-GOGATのC末端側をコードする約0.8kbpのcDNA断片をプローブとして、イネゲノムDNAライブラリーをスクリーニングした結果、11個の陽性クローンを得た。これらのクローンの制限酵素地図及び上記のcDNA断片とアルファルファ根粒NADH-GOGATのN末端側をコードする約1kbpのcDNA断片を用いたサザン解析の結果から、各クローンはプロモーター領域を含めたイネNADH-GOGAT遺伝子の全長を含む可能性のある約33kbpの領域を相補することが判明した。現在、これらのクローンの塩基配列を決定している。2 イネの生長過程の葉身及び根におけるNADH-GOGAT遺伝子の発現特性の解析アンモニア処理したイネ幼植物根において、NADH-GOGAT活性及びタンパク質含量は短時間でかつ鋭敏に増加した。このNADH-GOGAT活性の増加は、NADH-GOGAT mRNAの蓄積量の急激な増加を介して新規合成されたNADH-GOGATタンパク質の蓄積によることが示唆された。一方、栄養生長期のイネ葉身では、NADH-GOGAT mRNA含量は若い未抽出の葉身で多く、葉の成熟に伴って減少した。このNADH-GOGAT mRNAの変化は、NADH-GOGAT活性とタンパク質含量の変化と同様であった。3 イネNADH-GOGAT完全鎖長cDNAクローンの単離現在、上記の2の結果をもとに、イネの未抽出葉身とアンモニア処理した幼植物根から調製したPoly(A)^+RNAを用いてcDNAライブラリーを構築している。

The cDNA fragment of approximately 0.8 kbp at the C-terminal side of NADH-GOGAT gene was amplified by PCR from the NADH-dependent DNA synthase (NADH-GOGAT) gene. The cDNA fragment of the restriction enzyme and the cDNA fragment of the above gene were analyzed by using the cDNA fragment of about 1kbp at the N-terminal side of the NADH-GOGAT gene. It was found that the cDNA fragment of about 33kbp in the N-terminal side of the NADH-GOGAT gene was complementary to the cDNA fragment of about 33kbp in the N-terminal side. Now, the basic arrangement of the two groups is determined. 2. Analysis of the developmental characteristics of NADH-GOGAT genes in leaves and roots during the growth process of young plants. This increase in NADH-GOGAT activity and the rapid increase in NADH-GOGAT mRNA accumulation are the key factors in the synthesis of NADH-GOGAT mRNA. The content of NADH-GOGAT mRNA in leaves during the growth period decreased. The change of NADH-GOGAT mRNA, NADH-GOGAT activity and protein content are similar. 3. NADH-GOGAT Complete cDNA Sequence Analysis and Construction of cDNA Sequence Analysis System for Young Plant Roots

项目成果

Tomoyuki Yamaya: "A supply of nitrogen causes increase in the level of NADH-dependent gutamate synthase protein and in the activity of the enzyme in roots of rice seedlings" Plant and Cell Physiology. 36. 1197-1204 (1995)

Tomoyuki Yamaya：“氮的供应会导致稻苗根部 NADH 依赖性谷氨酸合成酶蛋白的水平和酶的活性增加”《植物和细胞生理学》。