顆粒層細胞による卵核胞期(GV期)ウシ卵の染色体凝集への影響

颗粒细胞对GV期牛卵染色体聚集的影响

基本信息

批准号：
07760268
负责人：
建本秀樹
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Hiroshima Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク合成阻害条件下で起こる卵核胞期(GV期)ウシ卵の染色体凝集は,顆粒層細胞を介した卵細胞内cAMP濃度の増加に伴うcAMP依存型タンパクリン酸化酵素(PK-A)の活性化によって抑制される。本研究は,GV期ウシ卵の卵核胞内染色体凝集過程を制御しているPK-A活性が成熟促進因子(MPF)の活性化に関与しているか否かを検討した。糸状染色体を有するGV期卵と凝集染色体を有するGV期卵のMPF構成タンパクであるp34cdc2キナーゼのリン酸化状態の変化をウエスタンブロッティング法により比較したところ,糸状染色体を有するGV期卵におけるp34cdc2キナーゼのSDS-PAGE上の移動度は,凝集染色体を有するGV期卵のそれと同じであつた。したがって,GV期ウシ卵の卵核胞内染色体凝集にp34cdc2キナーゼの脱リン酸化は関与していないと考えられた。一方,糸状染色体を有するGV期卵と凝集染色体を有するGV期卵のヒストンHlキナーゼ活性を液体シンチレーションカウンターを用いてそれぞれ測定したところ,凝集染色体を有するGV期卵のヒストンHlキナーゼ活性(65.4fmol/h/oocyte)が,糸状染色体を有するGV期卵のそれ(46.8fmol/h/oocyte)より有意に高かった。このことから,活性型ヒストンHlキナーゼがGVBD誘起前のウシ卵の染色体凝集に関わっていることが明らかとなった。以上の結果から,GV期ウシ卵におけるPK-A活性の低下はp34cdc2キナーゼの脱リン酸化と関係しない系でヒストンHlキナーゼ活性を増加させ,卵核胞内の染色体凝集を惹起させることが明確になった。

在抑制蛋白质合成条件下发生的卵静脉（GV期）牛卵的染色体聚集，通过cAMP依赖性蛋白酶（PK-A）的激活抑制了通过颗粒层内部cAMP浓度升高的cAMP依赖性蛋白酶（PK-A）。这项研究调查了调节GV期牛卵中染色体聚集过程的PK-A活性是否参与成熟促进因子（MPF）的激活。当比较p34CDC2激酶的磷酸化状态的变化时，GV-相卵的MPF-固定蛋白与丝状染色体和GV相卵具有汇总染色体，通过蛋白质散布，与p34cdc2 kinase cons sds-ppape in sds a a gv-phphphphphphphphphphphsaze in sds-pphphphphsaze in sds-chins in带有聚集的染色体的GV相卵。因此，人们认为p34CDC2激酶的去磷酸化不参与GV相牛卵中的排卵静脉中的染色体聚集。 On the other hand, the histone Hl kinase activity of GV-phase eggs with a filamentous chromosome and GV-phase eggs with aggregation chromosomes was measured using a liquid scintillation counter, and the histone Hl kinase activity (65.4 fmol/h/ocyte) of GV-phase eggs with aggregation chromosomes was significantly higher than that of GV-phase eggs with a丝状染色体（46.8 fmol/h/ocyte）。这表明活跃的组蛋白HL激酶在GVBD诱导之前参与牛卵中的染色体聚集。以上结果清楚地表明，在GV期牛卵中PK-A活性的降低会增加与p34CDC2激酶的去磷酸化无关的系统中组蛋白HL激酶活性，从而导致卵巢静脉内的染色体聚集。