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ウシ顆粒層細胞の分化に伴うPGF2αレセプター発現調節機構の解明

阐明牛颗粒细胞分化过程中PGF2α受体表达的调控机制

基本信息

批准号：
08660345
负责人：
奥田潔
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08660345/
关键词：
ウシ卵胞顆粒層細胞黄体化 PGF2αレセプター細胞培養 mRNA 黄体細胞

项目摘要

排卵直前の卵胞を構成する顆粒層細胞においてPGF2αが合成分泌されることが明らかとなり、PGF2αが卵巣内局所調節因子として作用することが示唆されている。しかし、その生理作用は多くの研究が行われているにもかかわらず、ほとんど解明されていない。PGF2αは細胞膜上の特異的なレセプターを介して作用することから、レセプターの発現とその調節機構の解明はPGF2αの生理的役割を明らかにする上で重要な意義があると考えられる。そこで、本研究ではウシ顆粒層細胞のPGF2αレセプター発現について遺伝子レベルでの検討を試みた。1,ウシ成熟卵胞あるいは小卵胞より採取した顆粒層細胞のPGF2αレセプターmRNA(PGFRmRNA)発現量について検討した。すなわち、採取した細胞を10%ウシ胎児血清を含むDMEM/F-12で培養した(37.5C,5%CO2in air)後、Guanidine thiocyanate法に従って総RNAを抽出してNorthen blotを行い、PGFRmRNAの検出を行った。その結果、熟成細胞より採取された顆粒層細胞においては、PGFRmRNAが検出されたが、小卵胞に由来する顆粒層細胞では認められなかった。2,小卵胞に由来する顆粒層細胞の分化あるいは黄体化過程におけるPGF2αレセプター調節機構を検討しうる実験系の確立を目的として、培養期間の延長に伴う培養顆粒層細胞のステロイド合成能の変化、形態的変化を検討した。その結果、顆粒層細胞を10%子牛血清を含むDMEM/F-12でInsulinとForskolin存在下において、216時間培養することにより機能的にも形態的にも大型黄体細胞に類似した細胞に分化することが明らかになった。本研究の成果は、日本繁殖生物学会の機関誌であるJournal of Reproduction and Developmentに掲載された。以上の結果から、顆粒層細胞の分化に伴いそのPGFRmRNA発現が誘起されることが明らかにとなった。また、PGFRmRNA発現調節機構の解明に有用な顆粒層細胞の黄体化を誘起しうる培養系が確立された。

Before ovulation, the oocytes were divided into cells, the synthesis and secretion of PGF2 α, the effects of factors in the internal organs of PGF2 α and PGF2 α on the synthesis and secretion of oocytes. In the study of physiological effects, there is a lot of research on the physiological effects of this disease. The function of PGF2 α gene on the cell membrane is very important. It is important to understand the physiology of PGF2 α. In this study, we found that there was no significant difference in the number of PGF2 α cells in this study. 1. Mature oocytes, small oocytes, PGF2 α cells, mRNA (PGFRmRNA) cells, mature oocytes, small oocytes, mature oocytes, mature oocytes, small oocytes, mature oocytes, After 10% fetal serum containing DMEM/F-12 (37.5C, 5% CO2in air), Guanidine thiocyanate method was used to extract the Northen blot line and PGFRmRNA to extract the cell line. The results showed that the mature cells were divided into four groups: the mature cells, the small oocytes and the small oocytes. 2. The cause of small oocyte differentiation, the process of luteinization, the process of luteinization, the process of PGF2 α, the process of luteinization, the process of luteinization. The results showed that 10% of the fetal bovine serum contained DMEM/F-12 and Insulin Forskolin in the presence of Elisa, and the morphological large luteal cell type was similar to that of cell differentiation assay. The results of this study were published in the Journal of the Japanese Society of Reproductive Biology, which was published in the journal Journal of Reproduction and Development. The results of the above results show that the differentiation of cells is associated with the development of PGFRmRNA. The government and PGFRmRNA institutions have made it clear that if they are useful, the cells are luteinized and the training system is established.