ゲルゾリンファミリー蛋白質アドセバリンの血管平滑筋細胞増殖への関与

凝溶胶蛋白家族蛋白Adsevalin参与血管平滑肌细胞增殖

• 批准号: 07770061
• 负责人: 大見 和宏
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770061/
• 关键词: ゲルゾリン; アドセバリン; 血管平滑筋; 細胞増殖

本研究では血管平滑筋でのアドセバリンの発現機構および細胞増殖に対する役割を解明することを主たる目的として以下の実験を行い重要な知見を得た。すでに報告されている牛アドセバリンcDNA塩基配列から幾つかのアンチセンスオリゴマー及びその配列に関してセンス、ミュータントオリゴマーを作成した。そしてそれらを培養牛血管平滑筋細胞内に導入しアドセバリンの発現に対する効果を抗アドセバリン抗体を用いてのイムノブロット法及蛍光抗体法で調べた。その過程で実験に用いた抗体は分子量74Kdの幾つかの蛋白質を認識し、血管平滑筋にアドセバリンアイソフォームが存在することがわかった。その中の一つのアイソフォームは牛副腎から最初に単離されたアドセバリンと同一の機能(カルシウム依存性にアクチンフィラメントを切断する)を有することが確認された。これらのアイソフォームがmRNAから蛋白質に翻訳された後に修飾されて生じた可能性もあるため、遺伝子レベルでアドセバリンの発現を調べた。牛頚動脈平滑筋組織及そこから酵素処理により調製した単離細胞の初代培養の過程の細胞からmRNAを精製し一本鎖cDNAを作成した。そして牛副腎アドセバリンcDNA塩基配列をもとに幾つかプライマーを作成しPCRを行った。その結果牛副腎アドセバリンcDNAと分子量がほぼ同一で一部配列が異なるアイソフォームが発現していることが明らかになった。現在各クローンの全塩基配列を解析中である。そして血管平滑筋に発現しているアドセバリンアイソフォームの塩基配列一機能関連を解析し、再びアドセバリンアイソフォームcDNA塩基配列から幾つかのアンチセンスオリゴマー及びその配列に関してセンス、ミュータントオリゴマーを作成し細胞内に導入し細胞増殖に対する役割を解析する。

This study is based on the mechanism of vascular smooth muscle and cell proliferation. The purpose of the work is to explain the meaning of the action and the purpose of the action. It is important to know and see.すでに Report されている牛アドセバリンcDNA 婩组组から九つかのアンチセンThe スオリゴマー and the びその are matched with the に关してセンス and the ミュータントオリゴマーをした.そしてそれらをCultured bovine vascular smooth tendon cells were introduced into The effect of anti-Analysis antibody is to adjust it by using the Anti-Analysis Antibody Method and the Phytophthora Antibody Method. The process of using the antibody and the protein with a molecular weight of 74Kd are known. , blood vessel smooth tendons are present in the blood vessels. The same machine as the original one Can (カルシウムdependencyにアクチンフィラメントをcut offする)を有することがconfirmされた.これらのアイソフォームがmRNAからproteinに译訳された后にmodificationされて生じたpossibilityもあるため、弝子レベルでアドセバリンの発行べた. The smooth tendon tissue of cow's arteries and enzyme treatment were prepared, and the initial culture process of isolated cells was carried out. The cells were purified and mRNA was refined, and cDNA was produced.そしてBovine accessory kidney アドセバリンcDNA base arrangement をもとに九つかプライマーを was made by しPCRを行った.そのRESULTS Bovine accessory kidney アドセバリンcDNAとMolecular weightがほぼThe same part The row is different and is not the same as the original one. The analysis of each クローンのcomplete base arrangement is currently ongoing.そしてvascular smooth tendon に発appears しているアドセバリンアイソフォームの塩组array 1. Functional correlation analysis and re-analysis of cDNA base alignmentら Several つかのアンチセンスオリゴマー和びその平流に关してセンス、ミュータントオリゴマーをGenerationしIntroduction into cellsしCell propagationに対する伙をANALYSISする.