熱ショック蛋白質hsp70の局在する単純ヘルペス感染特異的核内顆粒の構造

热休克蛋白 hsp70 定位的单纯疱疹感染特异性亚核颗粒的结构

• 批准号: 07770224
• 负责人: 小林 括平
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770224/
• 关键词: ストレス蛋白質; 単純ヘルペスウイルス; 遺伝子導入; アンチセンス; モノクローナル抗体; エレクトロポレーション

熱ショック蛋白質hsp70の単純ヘルペスウイルス(HSV)感染細胞における機能を解明する目的で、その細胞内局在性を検討し,hsp70が感染細胞核内の位相差顕微鏡で黒く見える顆粒構造(phase-dense granules、以下PDG)に局在することをすでに明らかにした.平成7年度は、1)hsp70の局在するPDGを単離,解析すること目的としてそのための条件の検討,2)種々のHSV抗原に対する抗体を用いた,hsp70とco-localizeするウイルス抗原の検索,3)hsp70過剰発現系,アンチセンスRNA発現系およびアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたhsp70機能の解析および4)抗hsp70モノクローナル抗体をエレクトロポレーションによって細胞内に導入することによるhsp70の機能解析を行った.1)では最終的な検定方法である免疫電顕法が,現有のモノクローナル抗体と細胞固定処理の不適合のため機能せず,現在凍結置換法について検討中である.2)ではHSV糖蛋白質,カプシド蛋白質および前初期蛋白質1種類について検討したが,hsp70とco-localizeするものは見い出されなかった.3)ではhsp70の欠失変異体を用いた検討から,HSV感染細胞におけるhsp70の核内顆粒への局在化に必要な領域を決定した.野生型遺伝子の過剰発現はHSV増殖には影響しなかった.またアンチセンスRNA発現系およびアンチセンスオリゴヌクレオチドのいずれもhsp70の合成を抑制できず,HSVの増殖に影響しなかった.4)では細胞内でhsp70と結合するクローンを見い出したが,この抗体はVero細胞におけるhsp70の核内顆粒への局在化を抑制しなかった.現在,hsp70発現レベルの低い神経系細胞株を用い,同様の解析を行っている.

In this study, the protein hsp70 was detected, and the cellular DNA (HSV) was detected. The purpose of hsp70 infection could be explained by the mechanism of cytoskeleton infection. The difference of the position of hsp70 infection in the nucleus of the cell was slightly different from that in the cell nucleus (phase-dense granules, PDG below). Pingcheng 7, 1) the hsp70 Bureau is in the process of quarantine, analyzing the conditions for the purpose of screening, 2) the use of anti-HSP70 antigens, HSP70 co-localize antigens, and 3) the presence of hsp70. The RNA machine was used to analyze the anti-hsp70 antibody. 4) the anti-hsp70 antibody was detected in the cell. The hsp70 machine was able to analyze the line. 1) the most effective method for the determination of DNA. There is an anti-virus antibody cell immobilization that does not match the mechanism. 2) HSV glycoprotein, anti-hsp70 glycoprotein, protein 1, protein, protein HSV infection affects the number of cells in the nucleus of hsp70, which determines the necessary domain. HSV colonization has been seen in the wild type of mackerel. The expression of RNA was detected in the cells of Vero cells, the particles in the nucleus of hsp70, the inhibition of hsp70 synthesis, the inhibition of hsp70 synthesis, the inhibition of DNA synthesis. Now, hsp70 shows that there is a low level of disease in the cell line, which is the same as that of the analysis.