再生筋細胞膜におけるジストロフィンと各種ジストロフィン結合蛋白の出現時期の検討

检查再生肌细胞膜中肌营养不良蛋白和各种肌营养不良蛋白结合蛋白的出现时间

• 批准号: 07770475
• 负责人: 村橋 真
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770475/
• 关键词: 再生筋; ジストロフィン; ジストロフィン結合蛋白; adhalin; β-dystroglycan; 免疫染色

【目的】ジストロフィン及びジストロフィンと強くリンクしているジストロフィン結合蛋白(DAP)の再生筋における発現様式を観察することにより、各種成分の発現時期や発現形態を明らかにする。【対象及び方法】成熟雄ウイスターラットの長指伸筋(EDL)に約1mlの塩酸bupivacaineを注入、操作1、2、4、8週後に各5匹ずつ同筋を摘出し、各時期の骨格筋に対してジストロフィン及び本年度はジストロフィン結合蛋白のうち、β-dystroglycan (43kDAG)、adhalin (50kDAG)の抗体で蛍光抗体間接法による免疫染色を行った。ジストロフィン抗体はHoffman博士により供与された羊抗60kジストロフィン抗体を、ジストロフィン結合蛋白の抗体はDAG precursor protein cDNAより決定されたアミノ酸配列よりペプチドを合成し羊に免疫して得たものをaffinity精製して使用した。【結果】塩酸bupivacaineを注入しない同ラットの対照筋ではジストロフィン、β-dystroglycan、adhalinは共に筋表面膜を連続性に明瞭に染色した。bupivacaine処理したラットではβ-dystroglycan、adhalinは操作後1週で筋表面膜に僅かに発現しており、2週以降では筋表面膜に全周性に発現していた。その発現様式はジストロフィンよりやや遅れていた。【結論】adhalin、β-dystroglycanはbupivacaine再生筋において操作1週頃より発現しはじめ、操作2週以後には明瞭に発現していた。【今後の計画】今後はα-dystroglycan (156kDAG)、syntrophin (59kDAP)等のジストロフィン結合蛋白について同様の検討を続けると共に、bupivacaine処理1週前後で発現してくるパターンを多く認めるため、bupivacaine処理3〜5日の超急性期における各種成分の発現について調べていく予定である。

【 objective 】 ジ ス ト ロ フ ィ ン and び ジ ス ト ロ フ ィ ン と strong く リ ン ク し て い る ジ ス ト ロ フ ィ ン binding protein (DAP) の regeneration muscle に お け る 発 presently others type を 観 examine す る こ と に よ り, all kinds of ingredients の 発 period now や 発 now form を Ming ら か に す る. Mature male like seaborne and び method 】 【 ウ イ ス タ ー ラ ッ ト の long refers to the common clubmoss (EDL) に about 1 ml の acid salt bupivacaine を injection, operation 1, 2, 4, 8 weeks after に 5 horses ず つ の with jin を pick out し, different periods of skeletal muscle に し seaborne て ジ ス ト ロ フ ィ ン and び this year は ジ ス ト ロ フ ィ ン binding protein の う ち, beta dys troglycan (43kDAG), adhalin (50kDAG) <s:1> antibody で蛍 photoantibody indirect method による immunostaining を row った. ジ ス ト ロ フ ィ ン antibody は Dr Hoffman に よ り さ and supply れ た sheep 60 k resistance ジ ス ト ロ フ ィ を ン antibody, ジ ス ト ロ フ ィ ン binding protein antibody は の DAG we protein CDNA よ り decided さ れ た ア ミ ノ acid with column よ り ペ プ チ ド を synthetic し sheep に immune し て have た も の を affinity of refined し て use し た. 【 results 】 salt acid bupivacaine を injection し な い with ラ ッ ト の polices according to jin で は ジ ス ト ロ フ ィ ン, beta dystroglycan, adhalin は に reinforcement surface film を even 続 sex に clear に dyeing し た. Bupivacaine 処 Richard し た ラ ッ ト で は beta dystroglycan, adhalin は operation after 1 week で muscle surface film に only か に 発 now し て お り, 2 weeks to drop で は reinforcement surface membrane に full weeks に 発 now し て い た. Youdaoplaceholder0 the pattern of そ ジストロフィ よ よ やや遅れて た た. 【 Conclusion 】 After one week of operation with adhalin and β-dystroglycan <s:1> bupivacaine for regenerating tendons, よ <s:1> じめ じめ occurred. After two weeks of operation, に was confirmed and に て た た た た was た. 【 Future Plan 】 In the future, youdaoplaceholder0 α-dystroglycan (156kDAG), syntrophin (59 kdap) の ジ ス ト ロ フ ィ ン binding protein に つ い て with others の beg を 検 続 け る と に, total bupivacaine 処 reason after 1 week ago で 発 now し て く る パ タ ー ン を く to recognize more め る た め, bupivacaine の 処 principle 3 ~ 5 super acute period に お け る components の 発 now に つ い て adjustable べ て い く designated で Youdaoplaceholder0.