ラット脳神経系の形態形成過程におけるCdc2キナーゼ活性の組織レベルでの検討

大鼠脑神经系统形态发生过程中组织水平Cdc2激酶活性检测

• 批准号: 07771418
• 负责人: 亀井 良政
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771418/
• 关键词: ビメンチン; cdc2キナーゼ; 細胞分裂; radial glia; gliogenesis

中枢神経系の形態形成のメカニズムを明らかとするために、細胞分裂期にある細胞を特異的に認識するモノクローナル抗体4A4(当研究室による独自開発)を用いて、ラット胎児・新生児の脳の免疫組織染色を行ない、分裂細胞の空間的・時間的分布を解析した。このモノクローナル抗体4A4は、細胞分裂期特異的に上昇する活性型cdc2キナーゼによってリン酸化を受けた中間径フィラメントのビメンチンを特異的に検出できる抗体である。ラット胎児・新生児期においては、グリア細胞のみに一過性にビメンチンが発現していることが知られており、従って、分裂グリア細胞のみを組織レベルで可視化できる。本年度の研究では、大脳では、分裂グリア細胞は全観察期間を通じて主にventricular zone(VZ)にのみ認められたのに対し、小脳では、観察初期にはVZのみに認められたが、その後小脳全域に分布が広がった。以上のことから、グリア細胞は大脳では神経細胞と同様VZで分裂を終えた後移動するのに対して、小脳では神経細胞の分化する領域に移動した後も細胞分裂を行うことが明らかとなり、部位により差異が存在することを初めて明らかとした。これは、中枢神経系の形態形成のメカニズム及びグリア細胞の機能的意義を解明する手がかりとなると考えられた。今後は、さらに脊髄、網膜等の臓器においても同様に分裂グリア細胞の空間的・時間的分布を解析し、これら臓器の形態形成におけるグリア細胞の果たす役割を明らかとしたい。

Central 経 god is の morphogenetic の メ カ ニ ズ ム を Ming ら か と す る た め に, cell division period に あ る cells を specific に know す る モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody 4 a4 (when laboratory に よ る 発) alone を with い て, ラ ッ ト tire where, where new の 脳 の immunohistochemical staining line を な い, splinter cell の space, the distribution of time を parsing し た. こ の モ ノ ク ロ ー ナ ル 4 a4 は antibodies, cell division phase specific に rise す る activity type cdc2 キ ナ ー ゼ に よ っ て リ ン acidification を by け た middle diameter フ ィ ラ メ ン ト の ビ メ ン チ ン を specific に 検 out で き る antibody で あ る. ラ ッ ト tire where, where new period に お い て は, グ リ ア cells の み に transient に ビ メ ン チ ン が 発 now し て い る こ と が know ら れ て お り, 従 っ て, divided グ リ ア cells の み を organization レ ベ ル で visualization で き る. This annual の study で は, big 脳 で は, divided グ リ ア cells during は 観 examine all を tong じ て main に ventricular zone (VZ) に の み recognize め ら れ た の に し seaborne, small 脳 で は early and examines 観 に は VZ の み に recognize め ら れ た が, そ の after small 脳 global distribution が に hiroo が っ た. Above の こ と か ら, グ リ ア cells は big 脳 で は god と 経 cells with others in VZ で divided を え た mobile after す る の に し seaborne て, small 脳 で は god 経 cells の す に る field mobile し た も after cell division line を う こ と が Ming ら か と な り, place に よ が り differences exist す る こ と を early め て Ming ら か と し た. こ れ は, central god 経 の morphogenetic の メ カ ニ ズ ム and び グ リ ア cell の を interpret the meaning of す る hand が か り と な る と exam え ら れ た. Future は, さ ら に spinal marrow, retinal の viscera に お い て も with others に split グ リ ア cells の space, the distribution of time を analytical し, こ れ ら viscera の morphogenetic に お け る グ リ ア cells の fruit た す "を cut Ming ら か と し た い.

项目成果

N. Inagaki: "Visualization of protein kinase activities in single cells by antibodies against phosphorylated vimentin and GFAP." Neurochem. Res.(in press). (1996)

N. Inagaki：“通过抗磷酸化波形蛋白和 GFAP 的抗体对单细胞中的蛋白激酶活性进行可视化。”

Y. Kamei: "Visualization of gliogenesis in the rat central nervous system-cdc2kinase-phosphorylated vimentin as a marker." Mol. Biol. Cell. 6. S97 (1995)

Y. Kamei：“大鼠中枢神经系统中胶质细胞生成的可视化 - cdc2 激酶 - 磷酸化波形蛋白作为标记。”

S. Tsujino: "Primary structure of light and neavy chain variable regions of antibodies recognizing phosphorylated vimentins." Biochem. Biophys. Res. Commun.in press. (1996)

S. Tsujino：“识别磷酸化波形蛋白的抗体的轻链和重链可变区的一级结构。”

M. Inagaki: "Phosphory lation-dependent centrol of intermediate filament assembly: An approach using phosphorylation site-specific antibodies" J. Neurochem.65. S74 (1995)

M. Inagaki：“中间丝组装的磷酸化依赖性中心：一种使用磷酸化位点特异性抗体的方法”J. Neurochem.65。