PCC-FISH法を用いた放射線障害予測の研究

PCC-FISH方法辐射损伤预测研究

• 批准号: 07857059
• 负责人: 石垣 孝
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857059/
• 关键词: PCC-FISH; 染色体異常; 放射線; 障害予測

M期のCHO細胞とヒトリンパ球とを、ポリエチレングリコールを用いて細胞融合させることを試みた。その結果、リンパ球に未成熟染色体凝集(PCC)を誘導させることに成功した。次にヒトリンパ球をin vitroで照射したのち、ポリエチレングリコールを用いて細胞融合させ、リンパ球に未成熟染色体凝集を誘導させることに成功した。また、照射線量とリンパ球の染色体異常の頻度との間に相関関係があるかどうかを、未成熟染色体凝集を誘導させて調べることを試みた。しかし、未成熟染色体凝集の出現頻度が低く、統計学的に有意な差は認められなかった。このため細胞融合に使用しているポリエチレングリコールの種類および濃度を変えることを試みたが、未成熟染色体凝集の出現頻度の著明な改善は得られなかった。今後の課題として、未成熟染色体凝集の出現頻度を高める必要があると考えられる。具体的には、1)細胞融合を行う際にポリエチレングリコールのかわりにセンダイウィルスを用いる。2)リンパ球と融合させる細胞の種類をCHO細胞ではなく別の種類の細胞に変える。3)フローサイトメトリーを用いて融合細胞を集める。等が考えられる。これらの方法により、未成熟染色体凝集の出現頻度を高めることができた場合には、第4染色体に特異的なDNAライブラリーをプローブに用いin situ hybridizationし、これをavidinfluoresceinを用いて蛍光染色を行う。これにより、第4染色体の染色体異常の頻度を求め、放射線照射線量との相関関係を調べる予定である。さらに、T細胞とB細胞を分離し、各々の放射線照射による染色体異常の出現頻度の違いについても、検討する予定である。

The CHO cells in the M phase were fused together. The results of this study were as follows: The next step is to induce immature chromosome aggregation in vitro. The frequency of chromosome abnormalities in the brain and brain is related to the amount of radiation. The frequency of immature chromosome aggregation is low, and the statistical difference is significant. The frequency of immature chromosome aggregation is improved by the use of different kinds of chromosome aggregation. The future problem is that immature chromosome aggregation occurs frequently. 1) Cell fusion is a process of cell fusion. 2) Different kinds of CHO cells are fused. 3) Fusion cells were collected. Wait for the test. In this way, the frequency of immature chromosome aggregation is high, and in this case, the specific DNA of chromosome 4 is used in situ hybridization, and avidinfluorescein is used in light staining. The frequency of chromosome abnormality of chromosome 4 was calculated. The correlation between radiation exposure and chromosome abnormality was determined. In addition, T cells and B cells are separated, and the frequency of chromosomal abnormalities due to radiation exposure is determined.