機械的圧迫による間接的な神経細胞障害メカニズムの解析-培養細胞系圧迫モデルを用いて-

机械压迫造成间接神经元损伤的机制分析——使用基于培养细胞的压迫模型——

• 批准号: 07857100
• 负责人: 大石 陽介
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857100/
• 关键词: 神経圧迫; グリオーシス; チロシンキナーゼ; RCR-1

神経圧迫障害の病体、特に神経再生を妨げるグリア細胞の増殖を理解するために、培養グリア細胞(ラット アストロサイトcell lime、RCR-1)の機械的圧迫に対する影響を分析した。細胞が培養されている密封したチャンバー内に一定量(0〜240mmHg)、一定時間(0〜60min.)ヘリウムを流入し、48時間後の細胞数および8時間後の^3H-Tdrの取り込みを計測した。その結果、機械的圧迫によりRCR-1の細胞増加およびDNA合成は有意に促進された。この圧迫は10分まで時間依存性で120mmHgまで容量依存性であった。この効果はチロシンキナーゼにより濃度依存的に抑制された。一方KN93、H7ならびにstaurosporineなどのPKG、PKA、PKC並びにCaMKのキナーゼインヒビターでは有意な抑制は認められなかった。圧迫が加えられた細胞のcAMPおよびIP3レベルの増加も認められなかった。また、stretch-activated channelのインヒビターであるGd^<3+>によっても抑制は認められなかった。従って、機械的圧迫-主にtransmural compressionであり、圧迫に伴うstretchではない-による細胞増殖には主にチロシンキナーゼが関与していることが示唆された。さらに圧迫が加えられた培養細胞の培養液を取り出し、圧迫が加えられていない培養細胞に加えると、圧迫60分後に取り出された培養液による反応をピークに細胞増殖並びにDNA合成が促進された。それゆえ、この圧迫による細胞増殖では、圧迫に伴いなんらかの物質が細胞により分泌され、それによりautocrineにその細胞自身が刺激され、細胞内では主にチロシンキナーゼが関与するpathwayで核内に情報が伝達され、DNA合成が生じ、細胞増殖が促進されたと判断した。同様の機械的圧迫や、圧迫に伴いRCR-1より分泌された物質が神経細胞にどのように関与するかについて現在研究をすすめている。

To analyze the effects of stress on the growth of cultured cell (RCR-1, RCR-1), especially on the disease and regeneration of nervous system. Cells are cultured in a sealed container for a certain amount (0 ~ 240mmHg) and time (0 ~ 60 min.) The number of cells after 48 hours and the number of cells after 8 hours were measured. As a result, mechanical stress was applied to RCR-1 cells and DNA synthesis was intentionally promoted. The pressure is 10 minutes. The time dependency is 120mmHg. The capacity dependency is 120mmHg. The effect of this is that the concentration is dependent on the concentration of the substance. KN93, H7, PKA, PKC, CaMK, KN93, PKA, PKC, CaMK, CaMK, CaMK The cAMP and IP3 of the cells were increased.また、stretch-activated channelのインヒビターであるGd^<3+>によっても抑制は认められなかった。The mechanical pressure is the main force of compression, and the pressure is accompanied by a stretch. The culture medium of the cultured cells was taken out after 60 minutes of pressure increase, and the culture medium was taken out after 60 minutes of pressure increase. In addition, the cell proliferation pathway, including the secretion of substances from the cell, the secretion of autocrine substances from the cell itself, and the induction of information from the nucleus, DNA synthesis, and cell proliferation, was also determined. The same mechanism of pressure, pressure associated with RCR-1, secretion of substances in the brain cells, and related research

项目成果

大石陽介: "機械的圧迫はアストロサイトの細胞増殖およびDNA合成を促進させる" 日本脊椎外科雑誌. (発表予定).

Yosuke Oishi：“机械压缩促进星形胶质细胞增殖和 DNA 合成”，《日本脊柱外科杂志》（待出版）。