下等動物食細胞における食作用の分子メカニズムの解析

低等动物吞噬细胞吞噬作用的分子机制分析

• 批准号: 07857163
• 负责人: 安住 薫
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857163/
• 关键词: 原索動物; 食作用; モノクローナル抗体; 血球; チロシンリン酸化

1.マボヤ血球の食作用と凝集反応を阻害するA74抗体が認識する血球膜抗原(A74蛋白質)の全構造を決定した。A74蛋白質N末端部分アミノ酸配列をもとにプライマーを作製し、マボヤ血球cDNAライブラリーを鋳型にしてPCRを行った。得られた50bpのDNA断片をプローブとしてマボヤ血球cDNAライブラリーから、A74蛋白質をコードするcDNAのスクリーニングを行い、最もインサートの長い3.4Kbのクローンについて全塩基配列を決定した。A74蛋白質cDNAクローンは、全長3390bpでpolyAテイルを含み、722アミノ酸をコードする一回膜貫通型の蛋白質で、全体としては既知の蛋白質とのホモロジーはなく、新規の膜蛋白質であった。細胞外ドメインに5つNグルコシド型糖鎖のコンセンサス配列と5つのシステイン残基があり、また、細胞内ドメインには、チロシンリン酸化を介するシグナル伝達に働くと考えられるモチーフ(ARAMモチーフ、SH2/SH3ドメイン結合配列)が存在した。特にARAMモチーフは、哺乳動物のT細胞やB細胞の抗原レセプターに特徴的なモチーフで、本研究により、脊椎動物以外の血球で初めて見い出された。さらに、A74蛋白質がマボヤ血球の凝集に伴いチロシンリン酸化されること、A74抗体と共沈する90Kと75Kの蛋白質もチロシンリン酸化されていることから、ARAMモチーフを介した細胞内蛋白質のチロシンリン酸化による情報伝達系が、原索動物の血球にも存在することが明らかになり、高等動物の免疫担当細胞の進化を探る上で貴重な情報が得られた。S-1B2抗体が認識するマボヤプラズマ中のCu-Zn型S0Dはマボヤ血球の食作用を促進することが明らかとなった。また、血球の非オプソニン依存性システムの食作用を阻害するRA5抗体が認識する抗原は、200Kの膜蛋白質である可能性が示唆された。

1. Determination of the complete structure of the hemocyte membrane antigen (A74 protein) recognized by the A74 antibody The N-terminal portion of A74 protein was cloned and sequenced. The 50bp DNA fragment was found to be in the middle of the DNA sequence, and the A74 protein was found to be in the middle of the DNA sequence. The length of the DNA fragment was 3.4 Kb. A74 protein cDNA is 3390bp long and contains 722 amino acids. It is a membrane penetrating protein. It is a novel membrane protein. The extracellular DNA sequence of the 5-N-terminal-type glycan is aligned with 5-N-terminal residues. The intracellular DNA sequence of the 5-N-terminal-type glycan is aligned with 5-N-terminal residues. The intracellular DNA sequence of the 5-N-terminal-type glycan is aligned with 5-N-terminal residues. In particular, ARAM has been shown to be the first to characterize T cells and B cells in mammals. A74 protein is involved in hemagglutination and protein acidification at 90K and 75K, and ARAM protein is involved in intracellular protein acidification. The evolution of immune responsible cells in higher animals is explored and valuable information is obtained. S-1B2 antibody is recognized by Cu-Zn type S0D, which promotes the phagocytosis of blood cells. The possibility that RA5 antibodies can inhibit the function of RA5 antigen and 200K membrane protein is demonstrated by the fact that RA5 antibody can inhibit the function of RA5 antigen and 200K membrane protein.

项目成果

Hiroki Takahashi: "A novel membrane glycoprotein involved in ascidian hemocyte aggregation and phagocytosis." Eur.J.Biochem.233. 778-783 (1995)

Hiroki Takahashi：“一种参与海鞘血细胞聚集和吞噬作用的新型膜糖蛋白。”

安住薫: "水産学シリーズ104水産動物の生体防御" (株)恒星社厚生閣, 129 (1995)

安昙薰：《水产科学系列104水生动物的生物防御》Seiseisha Koukaku Co., Ltd.，129（1995）

Benny P.Shum: "Unexpected β2-microglobulin sequence diversity in individual rainbow trout." Proc.Nat1.Acad.Sci.U.S.A.(印刷中). (1996)

Benny P. Shum：“虹鳟鱼个体中意外的 β2-微球蛋白序列多样性”（Proc.Nat1.Acad.Sci.U.S.A.）（出版中）。

安住薫: ""休眠状態"の癌転移巣では、癌細胞の増殖とアポトーシスが同時におきる." ファルマシア. 9. 1039-1040 (1995)

Kaoru Azumi：“在休眠的癌症转移中，癌细胞增殖和凋亡同时发生。” Pharmacia。 9. 1039-1040 (1995)

K.Azumi: "Effect of plant lectins on cellular defense reactions of ascidian hemocytes" Experientia. (印刷中). (1996)

K.Azumi：“植物凝集素对海鞘血细胞细胞防御反应的影响”Experientia（出版中）。