大脳皮質形成初期に特異的に発現する新しい遺伝子のクローニング及びその機能解析

大脑皮层形成早期特异表达新基因的克隆及其功能分析

• 批准号: 07858086
• 负责人: 米田 託成
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07858086/
• 关键词: 分子生物学; 中枢神経系; 発生; differential display; クローニング

高等生物における中枢神経系の形成機構の解明を目的とし、ラット胎生期中枢神経系、特に大脳皮質において発達段階に伴い発現の変化する遺伝子の取得を試みた。方法は胎生期において大脳皮質を形成する過程であるpreplate形成期とcortical plate形成期から大脳皮質組織を取得し、各々の組織で発現している遺伝子をdifferential display法を用いて比較した。実験結果として、preplate形成期(胎生12日目)とcortical plate形成期(胎生18日目)の胎児より得たmRNAのフィンガープリントを比較、胎生12日目にのみ発現するバンドより86クローンのDNAを抽出し、時期特異的な発現を示す遺伝子候補とした。得られたクローンの実際の組織内での発現を確認するためcRNA probeを用いたin situ hybridization法を施行した。それら発現様式を検討した結果、preplate形成期大脳皮質組織においてのみ強く発現する遺伝子、すなわち、時期特異性および部位特異性を併せてもって発現する遺伝子そのものは得られなかったものの、胎生期中枢神経系において比較的得られた組織においてのみ発現する遺伝子を6クローン得た。これら6クローンのうち胎生期の脳室周囲にのみ陽性反応を示すもの、すなわちneuroepitheliumもしくはその近傍の細胞に特異的に発現する遺伝子、および、preplate形成期終脳の一部に強く発現しその後発現が減弱していく様な遺伝子を、今後解析を行なう候補として選択した。これら2クローンについては、シークエンス解析を行ない、現在全長を得るべくライブラリースクリーニングを実施している。現時点で判明している遺伝子配列からは既知の遺伝子との相同性は確認されていない。

Higher biological に お け る central 経 god is の form institutions の interpret を purpose と し, ラ ッ ト TaiShengQi central 経 department, special に god 脳 cortex に お い て 発 da Duan Jie に with い 発 の now - the す る heritage 伝 child obtain の を try み た. Methods は TaiShengQi に お い て big 脳 cortex を form す る process で あ る preplate formation と cortical plate formation か ら big 脳 を obtain し cortex organizations, the 々 の organization で 発 now し て い る heritage 伝 son を differential display method を with い て compare し た. Experimental results: と と て, preplate formation period (12 days of gestation)とcortical Plate formation (viviparous 18 eyes) の tire where よ り have た mRNA の フ ィ ン ガ ー プ リ ン ト を comparison, viviparous 12 mesh に の み 発 now す る バ ン ド よ り 86 ク ロ ー ン の を DNA extraction し period, specific な 発 を now shown す heritage 伝 son alternate と し た. Have ら れ た ク ロ ー ン の be interstate の tissues で の 発 を now confirm す る た め cRNA probe を with い た the in situ hybridization method to execute し を た. そ れ ら 発 presently others type を beg し 検 た results, large preplate formation 脳 cortical tissue に お い て の み strong く 発 now す る heritage 伝, す な わ ち specificity, period お よ び site specificity を and せ て も っ て 発 now す る posthumous son 伝 そ の も の は have ら れ な か っ た も の の, TaiShengQi central god 経 に お い て compared to ら れ た organization に お い Youdaoplaceholder0 み shows する offspring 伝 を6 ロ ロ する た た た た た こ れ ら 6 ク ロ ー ン の う ち TaiShengQi の 脳 chamber weeks 囲 に の み positive anti 応 を shown す も の, す な わ ち neuroepithelium も し く は そ の alongside の cells に specific に 発 now す る heritage 伝, お よ び, preplate to form the final 脳 の a strong に く 発 now し そ の 発 now weakened が し て い く others な heritage 伝 を, In the future, for the analysis of the を line なう, the candidate と て て should be selected from 択 た. こ れ ら 2 ク ロ ー ン に つ い て は, シ ー ク エ ン ス parsing line を な い, now span を る べ く ラ イ ブ ラ リ ー ス ク リ ー ニ ン グ を be applied し て い る. Now point で.at し て い る heritage 伝 with sequence か ら は already know の heritage 伝 son と の identity は confirm さ れ て い な い.