Development of protein crosslinking technology using the newly found family transglutaminase substrates termed cementoin
使用新发现的转谷氨酰胺酶底物(称为水泥素)开发蛋白质交联技术
基本信息
- 批准号:08558096
- 负责人:
- 金额:$ 7.42万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
To develop an efficient method for protein crosslinking that is necessary for the design of highly organized, multifunctional protein complexes, we carried out the following basic and biotechnological studies on the newly found transglutaminase substrates termed trappins. Trappins are a family of proteins that have anchoring sequences at their amino termini through which they become covalently trapped at their sites of action ; the anchoring sequence is called cementoin moiety. 1) Using recombinant cementoin moieties, we showed that their sequences rich in Gin, Lys, and Pro have a random coil structure and serve as a good substrate for transglutaminase, a characteristics very useful for developing the biotechnology of protein crosslinking or protein gluing. 2) SPAI, a circulating plasma trappin, was demonstrated to be synthesized and secreted by the enteroendocrine cells located near the crypt base in small intestine. 3) Fluorescent cementoin was prepared by fusing it with green fluorescent protein. The useful properties of the component proteins are maintained in the fusion protein, namely we succeeded to prepare a fluorescent cementoin moiety that will be of special interest and importance in protein engineering. 4) Evolution of cementoin family genes was clarified. Analysis of gene structure revealed that genes for trappins have evolved by the shuffling of domains between the REST and SLPI genes and that the intron sequences have been homogenized by gene conversion.
为了开发一种高效的蛋白质交联方法,这是设计高度组织化的多功能蛋白质复合物所必需的,我们对新发现的转氨酶底物(称为陷阱蛋白)进行了以下基础和生物技术研究。陷阱蛋白是一类在其氨基末端具有锚定序列的蛋白质,通过锚定序列,它们被共价捕获在其作用位点;锚定序列被称为粘固妥英部分。1)使用重组牙骨质妥英部分,我们表明,他们的序列中富含Gln,Lys和Pro具有无规卷曲结构,并作为一个很好的底物转氨酶,一个非常有用的特性,用于开发生物技术的蛋白质交联或蛋白质胶合。2)SPAI是一种循环血浆捕获蛋白,由小肠腺底附近的肠内分泌细胞合成和分泌。3)将其与绿色荧光蛋白融合制备荧光牙骨质妥英。在融合蛋白中保留了组分蛋白的有用性质,即我们成功地制备了在蛋白质工程中具有特殊意义和重要性的荧光牙骨质妥英部分。4)阐明了牙骨质妥因家族基因的进化。基因结构的分析表明,陷阱蛋白的基因已经演变的REST和SLPI基因之间的结构域的改组和内含子序列已被基因转换均质化。
项目成果
期刊论文数量(20)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Isobe, T.et al.: "Propolypeptide of von Willebrand factor is a novel ligand for very late antigen-4 integrin." J Biol Chem.272. 8447-8453 (1998)
Isobe, T. 等人:“冯·维勒布兰德因子的前多肽是非常晚期抗原 4 整合素的新型配体。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
M.Furukawa 他: "Cryptic origin of SPAI,a plasma protein with a transglutaminase substtate domain and the WAP metif,revealed by in situ hybridization and immunohistochemistry" J.Biol.Chem.271. 29517-29520 (1996)
M. Furukawa 等人:“通过原位杂交和免疫组织化学揭示了 SPAI 的隐秘起源,SPAI 是一种具有转谷氨酰胺酶替代物结构域和 WAP metif 的血浆蛋白”J.Biol.Chem.271(1996)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
広瀬茂久: "糊代を持ったタンパク質" 化学と生物. 34. 632-633 (1996)
Shigehisa Hirose:“蛋白质与胶”化学与生物学 34. 632-633 (1996)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Yamada, T.et al.: "Possible roles of transglutaminases in Alzheimer's disease." Dement.Geriatr.Cogn.Disord.9. 103-110 (1998)
Yamada, T.et al.:“转谷氨酰胺酶在阿尔茨海默病中的可能作用。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
広瀬茂久: "糊代をもったタンパク質" 化学と生物. 34. 632-633 (1996)
Shigehisa Hirose:“蛋白质与胶”化学与生物学 34. 632-633 (1996)。
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- 通讯作者:
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