心臓洞結節カルシウムチャネルのクローニングと機能解析
心脏窦房结钙通道的克隆及功能分析
基本信息
- 批准号:08670049
- 负责人:
- 金额:$ 1.41万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
心臓洞結節細胞の自動能に関わるイオンチャネル、特に洞結節細胞のみに存在すると考えられる持続性内向き電流をクローニングする目的で我々は研究を行った。まず我々は家兎心臓洞結節由来のcDNAライブラリーの作成に成功した。現在このライブラリーのスクリーニングが進んでいる。L型カルシウムチャネルのα1サブユニットのリピートIVのS5-S6領域はジヒドロピリジン結合部位と考えられている。またこの部位はL型カルシウムチャネルのイオン選択性と関連することが知られている。我々はカルシウムチャネルのすべてのサブタイプに相当するS5-S6領域のプライマーをデザインし、家兎心臓洞結節由来のcDNAを材料にreverse transcript-polimerase chain reaction(RT-PCR)法を行い、新たなカルシウムチャネルのクローニングを試みた。現在までに約50のPCRフラグメントの塩基配列を解析した。その結果L型カルシウムチャネルと心臓型ナトリウムチャネルの2種類のチャネルが見つかった。洞結節L型カルシウムチャネルは塩基配列が今までクローニングされているL型カルシウムチャネルと一部異なり、新たなサブタイプである可能性がある。今後cDNAライブラリーのスクリーニングと、プライマー部位を変更してRT-PCRを進める一方、サブトラクション法、ディファレンシャルディスプレイ法などの方法によるクローニングも進めていく予定である。
The study was carried out to investigate the automatic activation of cardiac nodule cells and the existence of cardiac nodule cells. The cDNA sequence of the origin of the heart node was successfully constructed. Now you can enter the game. L-type ring formation of α1-type ring formation of S5-S6 ring formation of S5-S6 ring formation of α1-type ring formation of S5-S6 ring formation of α 1-type ring formation of S5-S6 ring formation of α 1-type ring formation of S5-S6 ring formation of α 1-type ring formation of αThe position of the ring is L shaped, and the ring is selectively connected. The reverse transcript-polymerase chain reaction(RT-PCR) method was used to detect cDNA from the S5-S6 domain, and a new method was developed to detect cDNA from the S5-S6 domain. About 50 PCR fragments are now analyzed for gene alignment. The result is that there are two kinds of L-type CCR and CCR. L-type cavity node L-type cavity node Now, the cDNA sequence is changed to RT-PCR, and the method of cDNA sequence is changed to RT-PCR.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nicoll,D.,A.,L.V.Hryshko,S.Matsuoka,et al.: "Mutation of amino acid residues in the putative transmembrane segments of the cardiac sarcolemmal Na^+-Ca^<2+> exchanger." Journal of Biological Chemistry. 271. 13385-13391 (1996)
Nicoll,D.,A.,L.V.Hryshko,S.Matsuoka,et al.:“心脏肌膜 Na^-Ca^2 交换器的推定跨膜片段中氨基酸残基的突变。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Matsuoka,S.,K.D.Philipson,and D.W.Hilgemann.: "Multiple functional states of the cardiac Na^+-Ca^<2+> exchanger.Whole-cell,native-excised,and cloned-excised properties." Annals of the New York Academy of Sciences. 779. 159-170 (1996)
Matsuoka,S.、K.D.Philipson 和 D.W.Hilgemann.:“心脏 Na^ -Ca^2 交换器的多种功能状态。全细胞、天然切除和克隆切除特性。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Hryshko,L.V.,S.Matsuoka,D.A.Nicoll,et al.: "Anomalous regulation of the Drosophila Na^+-Ca^<2+> exchanger by Ca^<2+>." Journal of General Physiology. 108. 67-74 (1996)
Hryshko,L.V.,S.Matsuoka,D.A.Nicoll,et al.:“Ca^<2> 对果蝇 Na^-Ca^<2> 交换器的异常调节。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Matsuoka,S.,D.A.Nicoll,Z.He,and K.D.Philipson.: "Regulation of the cardiac Na^+-Ca^<2+> exchanger by the endogenous XIP region." Journal of General Physiology. 109. 273-286 (1997)
Matsuoka,S.、D.A.Nicoll、Z.He 和 K.D.Philipson.:“内源性 XIP 区域对心脏 Na^-Ca^2 交换器的调节”。
- DOI:
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