細胞間相互作用に果たすプリン受容体の役割

嘌呤能受体在细胞间相互作用中的作用

• 批准号: 08670071
• 负责人: 古家 喜四夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670071/
• 关键词: 乳腺; 分泌上皮細胞; 筋上皮細胞; 細胞内カルシウム; 機械的刺激; カルシム波; 細胞間相互作用; プリン受容体

培養マウス乳腺分泌上皮細胞を機械的に刺激すると、液性因子(ATP,UTP,UDP)が放出されそれが周りの細胞のP_<2U>型プリン受容体を活性化することによるCa^<2+>波が観測される。この機械的刺激によって誘発されるCa^<2+>波は、生体内では腺胞を取り囲む筋上皮細胞の収縮がトリガーとなって起こると考えられる。それを証明するため、筋上皮細胞を含んだ培養乳腺細胞系を確立した。Ca^<2+>蛍光色素としてindo-1を負荷し共焦点顕微鏡によって蛍光像とノマルスキー像同時に観測した。オキシトシン投与によりコロニー中の筋上皮細胞がます反応し収縮がみられた。そして少し遅れて分泌上皮細胞で波のように広がるCa^<2+>上昇が数ヶ所で観測された。これが分泌上皮細胞であることは乳脂肪滴を持っているなど形態的にも推測されたが、P_<2U>受容体によってUTPに反応すること、P_2受容体の阻害剤であるスラミンがCa^<2+>波のみを抑制することによって確かめられた。すなわち筋上皮細胞の収縮が分泌上皮細胞への機械的刺激となってCa^<2+>波が発生することが明らかにされた。さらに興味深いことは、筋上皮細胞がATPに反応する事を見いだしたことである。単離した筋上皮細胞で調べた結果、ATPとADPは同等に反応しUTPとUDPはともに反応性は低いことから、P_Y型のプリン受容体の存在が示唆された。このことは既知のP_Y受容体の遺伝子配列を用いたRT-PCRによって確認された。また実際Ca^<2+>波が筋上皮細胞の収縮を引き起こすことは微小ガラスピペットを用いた機械的刺激によって発生させたCa^<2+>波によって筋上皮細胞が反応し収縮することによって確かめられた。以上の結果、乳腺腺胞において分泌上皮と筋上皮細胞が機械的刺激とヌクレオチド拡散によるCa^<2+>波を介して相互作用しているという新しい細胞間情報伝達系の存在が見いだされた。そしてプリン受容体がその情報伝達系のかなめとして働いていることが明らかにされた。

Cultured mammary gland secretory epithelial cells are stimulated mechanically and release cytokines (ATP,UTP,UDP) that activate P-type receptors in these cells<2U>. This mechanical stimulation induces Ca^&lt;2+&gt; waves in vivo and in vivo. The establishment of cultured mammary gland cell lines containing human breast epithelial cells Ca^&lt;2+&gt; light pigment indo-1 load confocal microscope The muscle epithelial cells in the middle of the cell wall were isolated from each other. The increase in Ca^&lt;2+&gt; in the secretory epithelial cells can be measured in a number of ways. The secretion of epithelial cells is the result of the inhibition of <2U>Ca^&lt;2+&gt; wave by the inhibitor of P_receptor, UTP and P_2 receptor. The cellular contraction and secretion of epithelial cells are stimulated by Ca^&lt;2+&gt; waves. In addition, the ATP content of the muscle epithelial cells was increased. The presence of ATP, UDP and P-type receptors is an indicator of the presence of P-type receptors. The sequence of the known P_Y receptor was confirmed by RT-PCR. Ca^&lt;2 +&gt; waves in muscle epithelial cells are induced by mechanical stimulation in the presence of minute Ca^&lt;2+&gt; waves in muscle epithelial cells. As a result, the existence of intercellular information transmission system was found in the mammary gland, secretory epithelium and tendon epithelium, which were stimulated by mechanical stimulation and Ca^&lt;2+&gt; wave mediated interaction. The information received by the receiver is transmitted from the receiver to the receiver

项目成果

古家喜四夫、榎本浩一: "カルシム波による細胞間情報伝達" 細胞工学. 16(1). 17-23 (1997)

Kishio Furuya，Koichi Enomoto：“钙波的细胞间信息传输”细胞工程 16(1)。

Enomoto K,Furuya K,et al.: "Expression cloning and signal transduction pathway of P_<2U> receptor in mammary tumor cell." Biological Signals. 5. 9-21 (1996)

Enomoto K，Furuya K，et al.：“乳腺肿瘤细胞中P_<2U>受体的表达克隆和信号转导途径。”

Yumura S,Furuya K & Takeuchi,I: "Spatial regulation of intracellular free calcium during chemotaxis of Dictyostelium cells." Journal of Cell Science. 109. 2673-2678 (1996)

汤村 S、古谷 K