法医解剖例における死因とアポトーシスによるDNA断片化との相関の基礎的検討

法医尸检案件死亡原因与细胞凋亡DNA碎片相关性的基础研究

基本信息

批准号：
08670503
负责人：
赤根敦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670503/
关键词：
アポトーシス DNA断片化死因法医解剖焼死

项目摘要

各種死因のうち温熱的損傷による死の際に誘導されるアポトーシスについて検討するために、動物実験で基礎的データを得、しかる後に実際の培検例から得た試料の分析結果と比較検討した。動物実験では、ICRマウスの死後直ちに取り出した肝臓と腎臓を試料として37〜65℃で1〜3時間加熱し、各試料から抽出したDNAの断片化の程度を比較した。65℃ではDNaseの変性のためDNAの断片化は全く認められなかったが、37〜50℃では温度および時間と相関して断片化が進行した(50℃では高分子量DNAが残存しなかった)。また腎よりも肝組織で断片化の程度が強く、臓器による反応性の差異が示唆された。37℃でも断片化は進行したが最高72時間加熱しても高分子量DNAは残存し、体温以上の加熱による断片化との識別が可能であった。37℃で放置後の各試料の50℃加熱の影響を検討したところ、肝組織では37℃で20分放置するだけで50℃加熱による断片化が有意に減弱したが、腎組織では6時間放置後も断片化が進行した。これらの臓器の反応性の差異は、死体からの臓器摘出の可否(温阻血時間の差異)と相関しているものと考えられた。以上の基礎的データをもとにして、実際の培検例から摘出した肝および腎組織のDNAを分析したところ、焼死以外の死因の死体のDNAは多少の断片化が認められ(高分子量DNAは残存)、動物実験で37℃で加熱した場合のパターンに類似していた。一方焼死例では、ほとんどの試料で断片化はほとんど認められず、65℃程度以上の加熱を受けたものと示唆された。1例のみは断片化が進行していたが、高分子量DNAは残存しておらず、焼死例以外の死因の場合の断片化とは識別可能であった。以上のように、組織中DNAの性状の分析が死因と相関する可能性が示されたが、さらに断片化DNAの定量などを行なってより詳細に死因との相関を検討する必要があった。

为了研究由于各种死亡原因在死亡导致死亡引起的凋亡，通过动物实验获得了基本数据，然后，将从实际培养测试案例获得的样品分析结果与从实际培养测试中获得的样品进行了比较。在动物实验中，将ICR小鼠死亡后立即提取的肝脏和肾脏在37-65°C的样品中加热1-3小时，并比较从每个样品中提取的DNA的片段化程度。在65°C下，由于DNase的变性，未观察到DNA碎片，但是在37-50°C下，碎片与温度和时间的相关性（在50°C下，没有高分子量DNA）。此外，肝组织中的碎裂程度比肾脏更强，表明器官之间的反应性差异。碎裂甚至在37°C下进行，但是即使加热长达72小时，高分子量DNA仍保留，从而可以辨别由于体温高于体温而引起的碎片化。当我们研究在37°C下剩下的每个样品的效果时，我们发现在肝组织中，通过在37°C下将其放置在37°C 20分钟的情况下，由于在50°C下加热引起的碎裂作用显着降低，但是在肾脏组织中，即使在6个小时下留下碎片，碎片也会进展。这些器官的反应性差异被认为与是否从尸体中取出器官（温暖控制时间差异）相关。基于上述基本数据，分析了从实际培养样品中提取的肝脏和肾脏组织的DNA，除了燃烧以外的死亡原因（高分子量DNA剩余）以外，尸体的DNA的某些碎片化，并且在37°C加热时类似于动物实验的模式。另一方面，在燃烧死亡的情况下，在大多数样品中几乎没有观察到碎裂，这表明患者被加热到约65°C或更高。尽管仅在一个情况下进行破碎，但没有高分子量的DNA仍然存在，并且在燃烧死亡的情况以外的死亡原因的情况下，它与碎片化。如上所述，结果表明，组织中DNA性质的分析可能与死亡原因相关，但是有必要进一步研究与死亡原因更详细地研究与死亡原因的相关性，例如通过量化碎片的DNA。