セクレチン受容体ノックアウトマウスの作成と生体機能の解析

促胰液素受体敲除小鼠的制作及生物学功能分析

• 批准号: 08670590
• 负责人: 岡林 克典
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670590/
• 关键词: セクレチン受容体; ノックアウトマウス

消化管ホルモンのひとつであるセクレチンは、膵をはじめ上部消化管で生理作用を有する。本研究ではジーンターゲッティング法により、セクレチン受容体ノックアウトマウスを作成し、そのマウスを用いて個体レベルでのセクレチン受容体の機能を、特に膵と上部消化管を中心に、明らかにしようとした。まず、既報のラットセクレチン受容体cDNAの塩基配列にもとずき、ラット膵より抽出したRNAを鋳型としてRT-PCR法によりラットセクレチン受容体cDNAを単離した。このcDNAをプローブとして、マウスゲノミックDNAライブラリーをスクリーニングし、2次・3次スクリーニングの後、最終的に2個のボジティブ・クローンを得た。これらのボジティブ・クローンのインサートのサイズは各々約13kbpであった。インサートのenzyme digestionにより、これらの2個のクローンは同一のものであった。このクローンについて種々の制限酵素による処理後、ラットセクレチン受容体cDNAの5'側500bpの領域をプローブとして、southern blottingを行った。これによりポジティブとなったcDNA断片(3-10kbp)を、pBSベクターにサブクローニングした。さらに、enzyme digestionやdeletionによりサブクローニングを行い、今までの所、全長13kbpのうち約4kbpについてシークエンスを完了したが、ラットセクレチン受容体cDNAとホモロジーのある領域を同定するには至っておらず、さらにシークエンスを継続中である。

The digestive tract has physiological effects on the upper digestive tract. The purpose of this study is to determine whether or not the recipient is able to use the machine, the upper digestive tract, and the upper digestive tract in this study. The cDNA of the receptacle was arranged in the base of the column, and the RNA was extracted. The RT-PCR method was used to isolate the capacitor. After the first two rounds of cDNA, the first two of the most successful, the second, third, second, second, third, second, second, third, second I don't know. I don't know. Make sure that both the enzyme digestion and the other two parties do not agree with each other on the same platform. After the production of various kinds of restriction enzymes has been done, the recipient cDNA

项目成果

Yoshinori Okabayashi: "Interaction of Shc with Adaptor Protein Adaptins" J.Biol.Chem.271. 5265-5269 (1996)

Yoshinori Okabayashi：“Shc 与衔接蛋白适应素的相互作用”J.Biol.Chem.271。