トランスジェニックマウスを用いた、放射線による急性肺傷害モデルの研究

转基因小鼠放射性急性肺损伤模型的研究

• 批准号: 08670652
• 负责人: 栗山 喬之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670652/
• 关键词: 肺傷害; 急性炎症; 放射線; DNA修復遺伝子; マウス; SCIDマウス; Ku70; サイトカイン

放射線照射による肺の急性傷害の形成過程における、DNA修復遺伝子の役割を調べるため、以下の研究を行った。DNA修復遺伝子の一つであるKu70については、そのgenomic formのクローニング、マツピング、解析を終了し、論文発表した。マウスKu70はマウス染色体15に存在し、13個のexonからなる25kbに及ぶ遺伝子であることが判明した。これらの情報はKu70遺伝子のノックアウト・マウス作成に有用である。次にDNA修復遺伝子のノックアウト・マウスおよびSCIDマウスでの実験の予備実験として、wild typeマウス(CB-17)を用いて、以下の実験を行った。マウスの胸部のみを照射する器具を作成し、胸部照射を行った場合のLD50は24週目において約16Gyであったが、急性反応が生じると思われる1週間以内では20Gy照射でもすべてのマウスが生存した。照射後、全肺、および気管支肺胞洗浄細胞からRNAを抽出し、β-actinを対照として、IL-1β,TNFα,TGFβ等のサイトカインの発現をRT-PCRにて半定量する方法を確立した。以上のサイトカインは照射前でも持続的に発現することが確認されたが、胸部照射の前後で発現に有意な変化は認められなかった。またwild typeでもSCIDマウスでも同様の発現であり、有意な差は認められなかった。従って、本研究の目的達成のためには胸部照射前に、炎症誘発物質の投与によるプライミングが必要と思われた。そこで胸部照射前にOK-432の気管内投与を行う方法を検討した。OK-432の気管内投与後、肺に急性炎症が生じ、各種サイトカインの発現亢進が認められた。現在、照射との併用での変化を検討中である。

Radiation exposure causes acute lung injury in the process of lung injury, DNA repair is used to cut the lung cancer, and the following studies are conducted. DNA revises the information from the Ku70, the genomic form, the text, and the table. Chromosome 15 was detected by Ku70, 25kb was detected by 13 exon genes, and chromosome was identified by PCR. I don't know what to say. I don't know. I don't know. In the second DNA repair, please do not know what to do. The following is the following: SCID repair, wild type repair (CB-17), and so on. The equipment for chest radiography is made, the chest radiography equipment is made, the LD50 24 eyes are closed, the 16Gy radiation is monitored, and the acute response is performed within 1 minute. 20Gy irradiation is required for survival monitoring. After irradiation, the whole lung, bronchoalveolar lavage cell, RNA cell extraction, β-actin radiation, IL-1 β, TNF α, TGF β were detected. RT-PCR was detected by semi-quantitative method. Before irradiation, you can confirm that you are suffering from radiation, and that you intend to change your symptoms before and after chest irradiation. The wild type is the same as that of the SCID. You have the intention to make a mistake. For the purpose of this study, it is necessary to think about the need for pre-irradiation of the chest and inflammation. Before the chest irradiation, the OK-432 tube was injected into the tube and the method was used. After intraductal administration of OK-432, acute inflammation of the lungs and all kinds of acute lung cancer were found to be hyperactive. Now, the radiation is used to change the temperature in the middle of the day.

项目成果

Yuichi Takiguch,Takayuki Kuriyama et al.: "Genomic Structure and Chromosomal Assignment of the Mouse Ku70 Gene" GENOMICS. 35. 129-135 (1996)

Yuichi Takiguch、Takayuki Kuriyama 等：“小鼠 Ku70 基因的基因组结构和染色体分配”GENOMICS。