肝不全治療をめざした新しい肝細胞分化増殖因子の探索

寻找新的肝细胞分化和生长因子以治疗肝衰竭

基本信息

项目摘要

本研究では、今までに肝再生因子の検索の対象となったことのない、胎児組織を中心に、また、検索の指標を単に放射性チミジン取込みといった細胞増殖ではなく、新しい観点から肝再生因子を探究し、新規な肝不全治療法を創生することを目的としている。本研究では、増殖因子の検出法として従来行われてきた、培養肝実質細胞の放射性チミジンの取込みではなく、肝の代表的分化機能である、薬物代謝能(7-エトキシクマリン脱エチル化活性)を用いた。まず、その検出法の簡便化のためにC18逆相カラムHPLCによる薬物代謝活性迅速定量法を確立し、少量(0.5〜1ml)の培養上清から直接に、しかも従来と同レベル(10nmol/1)の検出限界を有する検出法を確立した。一方、胎児組織の50%ホモジネートは37℃でゲル化することがわかり、肝細胞をゲル内培養することができた。この条件下の初代培養で、薬物代謝活性は、今のところ、EHSジェル(商品名マトリジェル)内培養の約半分の期間、維持されることがわかった。すなわち、EHSジェルの場合、弱いながら約30日にわたり薬物代謝活性が検出されるが、上記胎児組織ジェル内培養では10〜15日間に渡り、活性が検出できた。従来のコラーゲンコートディッシュ培養では活性維持が3日程度であることを考えると、この新規培養法において肝細胞の分化機能維持に有利な条件があると期待される。現在、胎児の週齢を変化させて、維持のできる最適条件を検討している。一方、肝上皮幹細胞の取得のために、コリン欠乏食で飼育したラット肝より吉里の方法に従い、小型肝細胞の取得を試みた。長期生存可能な細胞コロニーが観察され、現在、その細胞生物学的性状について検討している。
This study で は, today ま で に liver regeneration factor の 検 cable の is like と seaborne な っ た こ と の な い, tire where organization に を center, ま た, 検 の index を 単 に radioactive チ ミ ジ ン take 込 み と い っ た cells raised colonization で は な く, new し い 観 point か ら liver regeneration factor し を inquiry, new rules な liver insufficiency therapy を creation す る こ と を purpose と し て い る. This study で は, raised colonization factor の 検 out method と し て 従 come わ れ て き た, cultivate liver be stromal cells の radioactive チ ミ ジ ン の take 込 み で は な く, liver の representative function of differentiation で あ る, 薬 metabolic energy (7 - エ ト キ シ ク マ リ ン エ off チ ル activity) を with い た. ま ず, そ の 検 out method の easy の た め に C18 reverse phase カ ラ ム HPLC に よ る 薬 し を metabolic activity of rapid quantitative method established, a small amount (0.5 ~ 1 ml) の culture supernatant か ら に directly, し か も 従 to と with レ ベ ル (10 nmol / 1) の 検 out limit を have す る を 検 out the method to establish し た. Side, where organization の 50% ホ モ ジ ネ ー ト は 37 ℃ で ゲ ル change す る こ と が わ か り, liver cell を ゲ ル in cultivating す る こ と が で き た. こ の の under the condition of original culture で, 薬 は metabolic activity, today の と こ ろ, EHS ジ ェ ル (trade name マ ト リ ジ ェ ル) develop の within about half a minute, maintain さ during の れ る こ と が わ か っ た. す な わ ち, EHS ジ ェ ル の occasions, weak い な が ら about 30 に わ た り 薬 content metabolic activity が 検 out さ れ る が, written tire where organizations ジ ェ ル in cultivating で は 10 ~ 15 day に り watanabe, active が 検 out で き た. 従 to の コ ラ ー ゲ ン コ ー ト デ ィ ッ シ ュ cultivate で は active maintaining が 3rd level で あ る こ と を exam え る と, こ の new rules culture method に お い の て liver cells differentiation function maintain に な advantages が あ る と expect さ れ る. Now, the 児 児 cycle 齢を changes させて and maintains the <s:1> で る る る optimal conditions を検 seek て て る る る. Side and liver epithelial stem cells の の た め に, コ リ ン owe lack food で rearing し た ラ ッ ト liver よ り giri の way に 従 い and small hepatocellular の を try み た. Long-term survival may な cells コ ロ ニ ー が 観 examine さ れ, now, そ の cell biology character に つ い て beg し 検 て い る.

项目成果

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专利数量(0)
Enosawa et al.: "An attempt to add blological functions by genetic engineering in order to produce high performance bioreactor cells for hybrid artificial liver." Cell Transplantation. (in press). (1997)
Enosawa 等人:“尝试通过基因工程添加生物功能,以便生产用于混合人工肝的高性能生物反应器细胞。”
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    0
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絵野沢,他: "血中アンモニアの選択的除去を目的としたグルタミン合成酵素固定化ゲルの調整と機能評価" 人工臓器. (1996)
Enozawa 等人:“用于选择性去除血氨的谷氨酰胺合成酶固定凝胶的制备和功能评价”人工器官(1996)。
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    0
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Enosawa et al.: "Examination of 7-ethoxycoumarin deethylation and ammonia removal activities in 31 hepatocyte cell lines." Cell Transplantation. (1996)
Enosawa 等人:“检查 31 种肝细胞系中的 7-乙氧基香豆素脱乙基化和氨去除活性。”
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    0
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絵野沢 伸其他文献

Multipronged strategy of purposeful use of organs from non-heart beating donors
有目的地使用无心跳捐献者器官的多管齐下策略
  • DOI:
    10.11378/organbio.22.121
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    松野 直徒;古郡 茉利子;渡邊 賢二;庄中 達也;孟 玲童;今井 浩二;暮地本 宙己;渡部 剛;田崎 嘉一;西川 祐司;小原 弘道;絵野沢 伸;古川 博之
  • 通讯作者:
    古川 博之
機械学習を援用する臓器機能評価のための肝臓内画像流動計測法
利用机器学习评估器官功能的肝内图像流测量方法
  • DOI:
  • 发表时间:
    2020
  • 期刊:
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  • 作者:
    長谷川 海地;小原 弘道;松野 直徒;中條 哲也;絵野沢 伸;平野 俊彦
  • 通讯作者:
    平野 俊彦
国産GMP準拠のコラゲナーゼによるヒト肝細胞分離
使用符合 GMP 的国产胶原酶分离人肝细胞
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
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  • 作者:
    絵野沢 伸
  • 通讯作者:
    絵野沢 伸
機械灌流による代謝に着目した移植のための臓器機能評価技術、 Organ viability assessment technology using machine perfusion for transplantation.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
    小原弘道;吉川 遼;松野直徒;中條哲也;絵野沢 伸;平野俊彦
  • 通讯作者:
    平野俊彦
Hybrid assessment method of hydrodynamics and metabolism with digital biopsy using artificial intelligence for liver machine perfusion
利用人工智能进行肝机灌注的流体动力学和代谢与数字活检的混合评估方法
  • DOI:
    10.11378/organbio.28.142
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小原 弘道;二方 幹弥;佐藤 優樹;中條 哲也;暮地本 宙己;絵野沢 伸;李 小康;松野 直徒
  • 通讯作者:
    松野 直徒

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Chondrocyte differentiation from embryonic stem cells adjoined with defined mechanical load and the application to pediatric airway reconstruction.
胚胎干细胞的软骨细胞分化与特定的机械负荷相关,以及在儿科气道重建中的应用。
  • 批准号:
    23K08042
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
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異種移植拒絶反応における標的抗原の同定
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  • 批准号:
    07671348
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  • 资助金额:
    $ 1.34万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
手術侵襲による宿主免疫能低下とGVHD易誘発性の機序の解明
阐明手术侵袭导致宿主免疫功能下降和GVHD易感性的机制
  • 批准号:
    06671322
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    1994
  • 资助金额:
    $ 1.34万
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受動的免疫寛容(Passive Enhancement)を誘導する血清因子の解明
阐明诱导被动免疫耐受(被动增强)的血清因子
  • 批准号:
    04670754
  • 财政年份:
    1992
  • 资助金额:
    $ 1.34万
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    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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