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V/XI型コラーゲン分子の軟骨・非軟骨細胞における特異的発現機構の解析

V/XI型胶原分子在软骨和非软骨细胞中的特异性表达机制分析

基本信息

批准号：
08671661
负责人：
吉岡秀克
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671661/
关键词：
コラーゲン遺伝子発現軟骨細胞細胞外マトリックス

项目摘要

私たちはマウスα1(XI)鎖遺伝子の多様なスプライシングを調べる目的で、エクソン6A、6B、及びC-テロペプチドに対する特異なポリクローナル抗体をウサギに作製した。抗原として合成ペプチドを用いた。得られた抗血清はアフィニテイクロマトグラフィーにて精製し、ELISA法で特異抗体であることを確認した。これらの抗体を用いて、18日目胎児組織における分布を調べた。抗C-テロペプチド抗体による分布は軟骨に強い発現が見られた他に、骨格筋、血管平滑筋、心筋、骨、脳などの非軟骨組織においても分布が見られた。又、抗6B抗体による分布はこの分布と類似していた。しかし、抗6A抗体による分布はこれらとは異なっていた。軟骨では主に肥大軟骨部に見られ、筋組織では動脈平滑筋のみに限局しており、脳においては6Bより強いシグナルが得られた。この分布はα1(V)鎖の分布とも異なっていた。又、α1(V)鎖遺伝子の胎児における発現をみる為にRT-PCR法及びNorthern blot法を行った。その結果、肝以外の組織で広く発現が見られた。さらに、18日目胎児マウスの頭蓋骨及び舌組織におけるα1(V)鎖、α2(V)鎖及びα1(XI)鎖遺伝子の発現量をRT-PCR法で調べたところ、組織によりその量比が異なることがわかった。このように、V/XI型コラーゲンはα鎖の組み合わせによる分子型の多様性や、スプライシングによるα鎖の機能領域の多様性がみられ、これらは組織或は時期特異的に発現し、機能していることが予想された。

For the purpose of modulating the diversity of the α1(XI)-linked protein, it is necessary to select the 6A, 6B, and C-linked protein for the specific antibody to be produced. Antigen synthesis Antiserum was purified and confirmed by ELISA. The distribution of antibodies in fetal tissues was modulated on the 18th day. The distribution of anti-C-receptor antibodies was strongly observed in cartilage, muscle, vascular smooth muscle, heart muscle, bone, and non-cartilage tissues. In addition, the distribution of anti-6B antibody is similar to that of anti-6B antibody. The distribution of anti-6A antibody is different. Cartilages are hypertrophic, tendons are smooth, tendons are restricted, tendons are strong, cartilage is hypertrophic, tendons are hypertrophic, tendons are hypertrophic. The distribution of α1(V) is different from that of α1(V). In addition, the development of α1(V)-linked DNA was studied by RT-PCR and Northern blot. The results of the disease, liver and other tissues can be seen. The expression of α1(V), α2(V) and α1(XI) genes in the skull and tongue tissues of the 18-day-old fetus was determined by RT-PCR. The diversity of molecular types and functional domains of α-locks in the V/XI-type chain is expected to be different from that of tissue or time-specific development and function.