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精巣に特異的に発現する新規コラーゲン分子に関する研究

睾丸特异性表达的新型胶原蛋白分子的研究

基本信息

批准号：
11877275
负责人：
吉岡秀克
金额：
$ 1.28万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877275/
关键词：
XIX型コラーゲンノックアウトマウス精巣遺伝子発現

项目摘要

マウスゲノムライブラリーよりマウスα1(XIX)コラーゲン鎖をコードするcDNAを用いて遺伝子断片を得た。この遺伝子のエクソン4内にβ-ガラクトシダーゼ及びネオマイシン耐性遺伝子を挿入し、本遺伝子の翻訳が中断されると同時に、β-ガラクトシダーゼに変換されるようにしたコンストラクトを作製した。このコンストラクトを用いてES細胞に導入し、相同組み換え体をゲノムサザン法により選別し、インジェクション法により生殖系キメラを得た。さらにこれを交配させてノックアウトマウスを作製した。ホモ変異マウスは129/SV純系ハウスでは95%離乳前に死亡した。病態の所見は衰弱死で生後より殆ど体重が増加しない。生後1〜3週間生き延びたマウスはその後、体重が増加して、正常マウスと変わらなくなった。病理的所見として、生後、全身に発育遅滞が認められ腎臓、膵臓、肝臓に顕著であった。肝臓の多くには脂肪肝がみられた。しかし、生存し続け成長したマウスにおいては組織学的には変化を認めなかった。129/SV純系のホモ及びヘテロ変異マウスの胎児を用いてホールマウント法でβ-ガラクトシダーゼアッセイを行ったところ、精巣の精細胞管に鮮やかに染色され、組織学的にはセルトリ細胞と思われるところに染色されていた。されに現在融合タンパク質及び合成ペプチドを用いた特異的な抗体を用いた免疫組織化学及びin situ hybridization法を施行している。

The gene fragments were obtained from the cDNA fragments. In this case, the β-glucuronic acid and the β-glucuronic acid in the 4-membered ring are controlled. This method is used to introduce ES cells into the same group of cells. It is also used to select ES cells from different groups. This is the first time I've ever seen a woman. 95% of the purebred lines died before lactation. Sick and sick, weak and dead, weight gain after birth. 1 ~ 3 weeks after birth, the body weight increases, and the body weight increases. Pathological findings, postnatal development, systemic development, kidney disease, liver disease The liver is fatty and the liver is fatty. For the first time in my life, I've grown up. 129/SV pure line of sperm cells and sperm cells in the sperm cell tube staining, histological staining The fusion protein and synthetic protein were used to detect specific antibodies by immunohistochemistry and in situ hybridization.