クロマトグラフィーにおける分子認識機構と移動現象の解析による新規分離方法の開発

通过分析色谱中的分子识别机制和迁移现象开发新的分离方法

• 批准号: 10145241
• 负责人: 山本 修一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10145241/
• 关键词: クロマトグラフィー; 分子認識; イオン交換; タンパク質; 吸着サイト数

クロマトグラフィーは生体分子の分離分析には欠かすことのできない手法である。従来の研究は、分子認識は考慮せずに単に分配係数としてゾーン分散モデルに組み込む工学的解析と、bioaffinityやbioimprintingのように親和性のみを重点的に調査するという2つがほとんどである。しかしながら、分子認識とゾーン分散(移動速度)は独立ではないので分子認識機構と移動現象(ゾーン分散機構)を同時に解析することにより新規高分離性能クロマトグラフィーを開発することができる。特に生体巨大分子(分子量10万以上の抗体、プラスミド、さらにウイルス)のクロマトグラフィー分離機構はほとんどわかっていない。そこで 主として抗体(IgG)の吸着機構(分子認識と移動現象)を解析した。またHepatitis B surface antigen(以下HBsAg)粒子やparvovirusについても実験的検討を行なった。20nm程度の直径を持つ巨大な粒子として存在するHBsAgのような巨大分子の精製方法としては、大細孔径を持つ従来型充填剤の他に、粒子表面のみを利用する方法や、リガンドの三次元的配置を持つゲルを埋めこんだゲルなどが考えられる。架橋度が高いセルロース粒子に硫酸基を導入した吸着剤の分子排除特性から分子量数万以上のタンパク質は排除されることがわかった。この充填剤はHBsAgに対して強い親和性を持ち通常のIECより効率良く吸脱着精製が可能であった。また、IgGに対しても親和性を示し表面吸着のみであるにもかかわらず吸着速度が早いために動的吸着量は通常のゲル型IEC充填剤とほぼ同じ程度となった。ただしBSAには親和性を示さず他のIECゲルとは異なる分子認識機構があることが示唆された。

The separation and analysis of biological molecules In recent studies, molecular understanding has been studied in terms of the distribution coefficient, dispersion, composition, engineering analysis, bioaffinity, bioimprinting, affinity, and focus. Molecular cognition and dispersion (moving speed) are independent of each other. Molecular cognition and dispersion (moving speed) are simultaneous. Special biological giant molecules (molecular weight of more than 100,000 antibodies, top, bottom) and separation mechanism Analysis of adsorption mechanism of IgG (molecular recognition and migration phenomenon) Hepatitis B surface antigen(HBsAg) particles, parvovirus, etc. 20nm in diameter, large particle size, large molecular size, large pore size, filling agent, particle surface, three-dimensional arrangement, purification method, large pore size, large particle size, large particle size, particle The molecular exclusion characteristics of the particles with high molecular weight and sulfuric acid group introduction are as follows: The filling agent has a strong affinity for HBsAg, and the IEC has a good absorption and purification ability. The affinity of IgG and IgG shows that the adsorption rate of IgG and IgG on the surface is different. The adsorption amount of IgG and IgG on the surface is different. The affinity of BSA is different from that of other molecular recognition organizations.

项目成果

山本修一: "バイオクロマトグラフィーにおける分子認識" バイオサイエンスとバイオインダストリー. 57(印刷予定). (1999)

Shuichi Yamamoto：“生物色谱中的分子识别”生物科学和生物工业 57（待印刷）。

山本修一: "吸着・クロマトグラフィーによる食品分離" 食品工業. 42(印刷予定). (1999)

Shuichi Yamamoto：“通过吸附和色谱法分离食品”食品工业42（待印刷）。