癌化におけるテネイシンCとテネイシンXのクロストークの機構

腱蛋白C和腱蛋白X在致癌过程中的串扰机制

• 批准号: 10152258
• 负责人: 松本 健一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152258/
• 关键词: 細胞外マトリックス; テネイシンファミリー; two-hybrid; VEGF

癌化における細胞外マトリックス・テネイシンX(TNX)とテネイシンC(TNC)のクロストークの機構を調べるために、TNXやTNCと相互作用する分子の探索を行った。1. マウスTNXに特異性の高い配列であるフィブロネクチン・タイプIII(FNIII)配列をbaitとして、酵母two-hybridの系を用いHeLa細胞由来CDNAライブラリーをスクリーニングしたところ、TNXのFNIII領域に結合する因子として血管内皮増殖因子(VEGF)のメンバーの一つであるVEGF-B186を同定した。その他、細胞膜レセプタータンパク質であるNa,K-ATPase beta-3 subunitを同定した。2. 一方マウスTNCに特異性の高い配列であるFNIII配列をbaitとして、同様のスクリーニングを行ったところ、TNCのFNIII領域に結合する分子としてbeta-2 microglobulinや精巣上体分泌タンパク質を同定した。3. これらのTNXやTNCと結合する分子の中で、特に癌悪性度などの関係で興味深いVEGF-B186とTNXとの相互作用についてさらに検討を行った。VEGF-B186のTNX・FNIIIとの結合には、VEGF-Bの二つのアイソフォーム(VEGF-B186とVEGF-B167)に共通の配列であるN末端から137aaが必要であることが明らかとなった。またTNXの、VEGF-B186との結合に必要な配列の決定を行ったところ、VEGF-B186に結合するのはbaitに用いたFNIII配列のところのみで、TNXの他の領域たとえばヘプタッド・リピート領域、フィブリノーゲン様領域にはVEGF-Bは結合しないことが明らかとなった。4. まだ現在のところ酵母two-hybridの系での確認のみであるが、VEGF-BはTNXのFNIII配列のみならずTNCのFNIII配列とも結合することが明らかとなった。

为了研究癌症发育期间细胞外基质Tenasin X（TNX）和Tenasin C（TNC）之间的串扰机制，我们搜索了与TNX和TNC相互作用的分子。 1. When a HeLa cell-derived CDNA library was screened using the yeast two-hybrid system using the fibronectin type III (FNIII) sequence, a highly specific sequence for mouse TNX, VEGF-B186, one of the members of vascular endothelial growth factor (VEGF) was identified as a factor that binds to the FNIII region of TNX.此外，还鉴定了Na，K-ATPase Beta-3亚基，该亚基是细胞膜受体蛋白。 2。另一方面，FNIII序列是小鼠TNC的高度特异性序列，用作诱饵，并进行了类似的筛选，并且将β-2微果蛋白和附子分泌的蛋白识别为与TNC FNIII区域结合的分子。 3。在与TNX和TNC结合的这些分子中，我们进一步研究了VEGF-B186和TNX之间的相互作用，这与癌症恶性肿瘤有关。已经揭示了N端的137AA，这是VEGF-B的两个同工型（VEGF-B186和VEGF-B167）共有的序列，将VEGF-B与TNX与TNX和FNIII结合。此外，当我们确定TNX与VEGF-B186结合所需的序列时，发现仅用于诱饵的FNIII序列与VEGF-B结合，并且VEGF-B不与其他TNX的其他区域结合，例如Heptad重复区域或纤维蛋白原成像区域或类似纤维蛋白的样区。 4。目前，仅在酵母双杂交系统中进行了确认，但已经揭示了VEGF-B不仅与TNX的FNIII序列结合，还与TNC的FNIII序列结合。