GST-π遺伝子導入造血幹細胞移植によるアレキル化剤に対する骨髄耐性化療法の開発

通过GST-π基因转染的造血干细胞移植开发针对芳烷基化剂的骨髓耐受疗法

• 批准号: 10153257
• 负责人: 新津 洋司郎
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153257/
• 关键词: 耐性; 幹細胞移植; GST-π; アルキル化剤

A. 研究目的本研究ではアルキル化剤をはじめ各種抗癌剤に対して耐性を示すGST-π遺伝子を導入した造血幹細胞移植の抗癌剤耐性化療法としての有効性をin vivoで明らかにすることを目的とする。B. 方法と結果(1) ヒトCD34+幹細胞への遺伝子導入はGST-π発現レトロウイルスベクター(PLJGST-π)を用いfiburonectinをコートしたプレート上で行った。4-HCおよびadriamycin存在下でCFU-GM colony assayを行いそれぞれの抗癌剤に対する耐性を検討した結果、両者ともGST-π導入D34+細胞で対照に比較し有意に多くのCFU-GM colony形成が認められた。(2) BALB/cマウスの骨髄単核球(BMMNC)に同様にGST-π遺伝子を導入した。別のBALB/cマウス(1st recipient)にtotal body irradiation (TBI)10Gy施行後GST-π導入BMMNC(1x105)を移植した。移植28日後にcyclophosphamide(CY)100mg/kgを静脈内投与した。同様の投与をさらに6週後、12週後に行った。投与後4,8,16日目の末梢血白血球数を測定した。その結果1コース目のCY投与後白血球減少率はGST-π移植マウスで44±6%、対照マウス(NeoR)で55±10%と両者間で有意差を認めなかった。しかしながら2コース目ではGST-π移植マウスで32±5%,対照群で64±11%と有意に軽度であった。さらに3コース目では対照群が80±3%と強度の白血球減少を来したのに対しGST-π移植マウスでは白血球減少を認めなかった。(3) 3コース目のCY投与4週後にGST-πmRNA発現をRT-PCRで検討した結果、CFU-GM,CFU-Megでそれぞれ50%,BFU-Eで60%にmRNA発現を確認した。以上より本療法で骨髄のアルキル化剤に対する耐性化が可能と考えられた。

A. Objective: To investigate the efficacy of GST-II gene in hematopoietic stem cell transplantation. B. Methods: (1) The gene expression of CD34 + stem cells was induced by GST-π. The CFU-GM colony assay was performed in the presence of 4-HC and adriamycin. The results showed that the CFU-GM colony assay was more resistant to GST-π than that of D34+ cells. (2)BALB/c BMMNC is the same as GST-π gene. GST-π was introduced into BMMNC(1x105) after 10Gy administration. Cyclophosphamide(CY)100mg/kg was administered intravenously 28 days after transplantation. The same kind of investment was carried out 6 weeks later and 12 weeks later. The peripheral white blood cell count was measured 4, 8 and 16 days after administration. The results showed that the leukopenia rate was 44±6% and 55±10% respectively after GST-π transplantation and CY administration. GST-π transplantation was 32± 5%, and the contrast group was 64±11%. The white blood cell count was 80±3%. The white blood cell count was 80±3%. (3)RT-PCR analysis showed that GST-πmRNA expression was 50% and 60% in CFU-GM,CFU-Meg and BFU-E respectively after 3 weeks and 4 weeks of CY administration. The above treatment is a combination of bone marrow and tissue.

项目成果

Sato T, Niitsu Y, et al.: "An apoptosis-inducing gene therapy for pancreatic cancer with a combination of 55-kDa receptor gene transfection and mutein TNF administration." Cancer Res.58. 1677-1683 (1998)

Sato T、Niitsu Y 等人：“一种结合 55-kDa 受体基因转染和突变蛋白 TNF 给药的胰腺癌凋亡诱导基因疗法。”

Hirayama Y, Niitsu Y, et al.: "Concentrations of thrombopoietin in bone marrow in normal subjects and in patients with idiopathic thrombocytopenic purpura, aplastic anemia, and essential thrombocythemia correlate with its mRNA expression of bone marrow st

Hirayama Y、Niitsu Y 等人：“正常受试者和特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血和原发性血小板增多症患者骨髓中血小板生成素的浓度与其骨髓中血小板生成素的 mRNA 表达相关。

Takayama T, Niitsu Y, et al.: "Abberant crypt foci of the colon as precursors of adenomas and cancer." New Eng J Med.399. 1277-1284 (1998)

Takayama T、Niitsu Y 等人：“结肠的异常隐窝病灶是腺瘤和癌症的前兆。”