哺乳動物前脳に特異的な形態形成遺伝子Nkx-2.1の発現制御機構の解析

哺乳动物前脑特异性形态发生基因Nkx-2.1表达调控机制分析

• 批准号: 10156209
• 负责人: 中福 雅人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10156209/
• 关键词: 神経発生; 幹細胞; 領域特性; ニューロン; ヘッジホッグ

ヒトを含む哺乳動物の脳は、それぞれ異なる領域特異性をもった極めて多様な細胞群によって構成されている。脳神経系の領域特異化のひとつである背腹軸に沿ったパターン形成においては、Sonic hedgehog(Shh)と呼ばれる分泌性シグナル因子が重要な役割を果たす。一方、ホメオボックス遺伝子であるNkx-2.1は、Shh依存的に将来の視床下部原基である前脳腹側部に特異的に発現し、視床下部の発生に必須の機能を果たすことが知られている。本研究では、このNkx-2.1遺伝子の前脳特異的な発現を制御する機構の解析を通して、脳の領域特異的分化の機構の解明を目指した。まず、我々が樹立したShh応答性の神経前駆細胞株MNS-70をモデル系として、Nkx-2.1遺伝子のShh依存的発現誘導の分子機構を解析した。その結果、Shhの下流ではZinc-finger型転写因子であるGliファミリー遺伝子群が機能しており、そのうちGli1,Gli2の2種類の因子がNkx-2.1遺伝子の発現に重要な役割を担っていることを明らかにした。次にNkx-2.1遺伝子の前脳腹側特異的な発現を制御する機構を明らかにするため、その染色体遺伝子断片を単離し、発現制御領域を解析した。タンパク質コード領域周辺の約14kbpの染色体遺伝子に由来する種々の制限酵素断片をβ-galactosidase遺伝子の上流に接続したキメラ遺伝子を作成し、これらをマウス受精卵に導入して、トランスジェニックマウス胎児における発現パターンを解析した。その結果、転写開始点の上流約3kbpの領域に基本プロモーター活性およびshh依存的な神経系での発現を制御する活性があることが判明した。現在さらに前脳特異性を規定する領域の検索を進めている。

ヒトをcontaining mammals, それぞれdifferent なる domain-specific をもったpolar めてmulti-様なcell group によって constitute されている. The field of specialization of the 脳神経 system, the dorsoventral axis, the dorsoventral axis, the formation of the dorsoventral axis, Sonic Hedgehog (Shh) is an important secretory factor of Hedgehog. One side, ホメオボックス伝子であるNkx-2.1は, Shh dependent future のview bed lower part primordium There is a specific function in the ventral part of the anterior epidermis, and there is a must-have function in the lower part of the bed of the bed. In this study, the analysis and analysis of Nkx-2.1, the field-specific differentiation mechanism of the field-specific analysis of the mechanism of control and control, and the analysis of the mechanism specific to the area. We established the Shh-responsive MNS-70 cell line and analyzed the molecular mechanism of Shh-dependent induction of Nkx-2.1.そのRESULTS、Shhのdegradable ではZinc-finger type 転WRITING FACTOR であるGliファミリー legacy 伝子组がFUNCTION しており、そのうちGli1, Gli2の2 kinds of factors のNkx-2.1 缝子の発成にimportantなservice cutを聣ていることを明らかにした. Nkx-2.1 has a specific な発成をcontroller mechanism を明らかにするため on the ventral side of the genus of the genus, そのchromosome legacy 伝子 fragment を単出し, and 発appears the control area をanalytics した.タンパク性コード区辺のabout 14kbpのChromosome legacy㼝子にoriginするkind々のRestricted enzyme fragmentをβ-galactosidase legacy 伝子のUpstreamに开続したキメラ伝子を成し、これらをマウス Fertilized egg にINTRODUCTIONして.そのRESULTS, 転WRITING STARTING POINT UPSTREAM ABOUT 3Kbp のREAD BASIC プロモーターACTIVITY およびshh depends on the な神経 system and the での発appears and controls the するactivities and があることが明明した. Now the specific rules and regulations of the current field are the same.