膜結合型プロテアーゼ複合体とその多様な機能:大腸菌FtsH複合体の解析

膜结合蛋白酶复合物及其多种功能：大肠杆菌 FtsH 复合物的分析

• 批准号: 10163222
• 负责人: 秋山 芳展
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10163222/
• 关键词: FtsH; HflKC; タンパク質分解

FtsHは大腸菌のATP依存性膜結合型プロテアーゼである。我々はFtsHが複合体を形成し得なかった膜複合体サブユニット(SecYやFoaなど)の分解に関わること、FtsHがホモオリゴマーを形成するとともに、膜タンパクHflK/HflCともへテロ複合体を形成することを示してきた。本年度は以下のような結果を得た。(1)FtsHのぺリプラズム領域の役割の解析:FtsHのペリプラズム領域の欠失変異及びランダムな挿入変異を作製し解析した結果、ペリプラズム領域はFtsHのホモオリゴマー形成、HflKCタンパク質との相互作用に重要であり、ペリプラズム欠失体はin vivoではSecYの分解は野生型と同定でに起こすが、CΙΙ蛋白質の分解能が低いことを見いだした。(2)FtsHの変性タンパク質結合能の解析:FtsHはATP非依存的に変性させたアルカリ性ホスファターゼ(PhoA)に結合するが、native PhoAには結合しないこと、精製FtsHが37℃加温により凝集体を作るが、ATPがこれを抑制することを見いだした。(3)FtsHの新たな基質膜タンパク質YccAの解析:7回膜貫通型タンパク質YccAがFtsHいより分解されること見いだした。変異型YccA(YccAll)はFtsHによる他の基質の分解を阻害する。その解析から、膜蛋白基質と可溶性タンパク質基質では、部分的に異なる経路によりFtsHに分解されること、この「分化」にHflKCが関与することを提唱した。

FtsH ゼである Escherichia coli <s:1> ATP-dependent membrane-bound type プロテア ゼである ゼである ゼである. I 々 は FtsH が complex を form し must な か っ た membrane complex サ ブ ユ ニ ッ ト (SecY や Foa な ど) の decomposition に masato わ る こ と, FtsH が ホ モ オ リ ゴ マ ー を form す る と と も に, membrane タ ン パ ク HflK/HflC と も へ テ ロ complex を form す る こ と を shown し て き た. For the current year, the following ような ような results を obtain た. (1) FtsH の ぺ リ プ ラ ズ の ム field service cut の analytic: FtsH の ペ リ プ ラ ズ ム field の owe - vision loss and び ラ ン ダ ム な し parse the scions into - different を cropping し た results, ペ リ プ ラ ズ ム field は FtsH の ホ モ オ リ ゴ マ ー formation, HflKC タ ン パ ク qualitative と の interaction に important で あ り, ペ リ プ ラ ズ は ム owe lost body The in vivo で は SecY の decomposition は wild-type と with fixed で に up こ す が, C Ι Ι protein decomposition can が low い の こ と を see い だ し た. (2) FtsH の - sex タ ン パ ク quality, and the binding energy の analytic: FtsH は ATP of interdependent に - sex さ せ た ア ル カ リ sex ホ ス フ ァ タ ー ゼ (PhoA) に す る が, native PhoA に は combining し な い こ と, refined FtsH が 37 ℃ heating に よ り coagulation group を る が, ATP が こ れ を inhibit す る こ と を see い だ し た. (3) FtsH new た の な matrix membrane タ ン パ ク qualitative YccA の analytic: 7 transmembrane type back タ ン パ ク qualitative YccA が FtsH い よ り decomposition さ れ る こ と see い だ し た. Variant YccA(YccAll) <s:1> FtsHによる his <s:1> matrix <e:1> decomposition を inhibition する. そ の parsing か ら, membrane protein matrix と soluble タ ン パ ク mass matrix で は, part of the に different な る 経 road に よ り FtsH に decomposition さ れ る こ と, こ の "differentiation" に HflKC が masato and す る こ と を mention sing し た.

项目成果

Yoshinori Akiyama: "Polypeptide-binding of Escherichia coli FtsH(HflB)" Molecular Microbiology. 23. 803-812 (1998)

Yoshinori Akiyama：“大肠杆菌 FtsH(HflB) 的多肽结合”分子微生物学。

Akio Kihara: "Differential pathways for protein dogradation by the FtsH/HflKC mimbrane-embeded proteale complex: an implication from the interference by a mutant form of new substanse" Journal of Molecular Biology. 279. 175-188 (1998)

Akio Kihara：“FtsH/HflKC 膜嵌入蛋白质复合物的蛋白质降解的不同途径：新物质突变形式的干扰的暗示”《分子生物学杂志》。

Yoshinori Akiyama: "Roles of the periplasmic domain of Escherichiacol: FtsH(HflB)in protein interactions and actinty modulation" Journal of Biological Chemistry. 273. 22326-22333 (1998)

Yoshinori Akiyama：“大肠杆菌周质结构域的作用：FtsH(HflB) 在蛋白质相互作用和肌动调节中”《生物化学杂志》。