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膜結合型プロテアーゼ複合体とその多様な機能:大腸菌Frsh複合体の解析

膜结合蛋白酶复合物及其多种功能：大肠杆菌 Frsh 复合物的分析

基本信息

批准号：
09267219
负责人：
秋山芳展
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09267219/
关键词：
タンパク質分解 FtsH 膜タンパク質 HflKC SecY 溶原化 ATPase

项目摘要

ftsH変異株中でλファージの溶原化・溶歯決定に重安なcII蛋白質が安定化されることから、FtsHがcIIの分解に関わることが示されていたが、精製蛋白質を用いてFtsHが直接cIIを分解するプロテアーゼである事を示した。FtsHと複合体を作り、そのプロテアーゼ活性を調節する膜蛋白質複合体HflK・HflCが従来の推測と異なり、ペリプラズムに大きなドメインを持つこと、それ自身はcIIを分解するプロテアーゼ活性を持たないことを明らかにした。hflKC変異が膜蛋白質であるSecY及びFoa、細胞質蛋白質cIIの分解に及ぼす効果を調べ、HflKCは膜蛋白質と細胞質蛋白質の分解では異なる調節機能を果たすことを見出した。SecY分解不全変異株の解析から新たなFtsH基質膜蛋白質YccAを見山した。変異型YccAはSecYやFoaの分解を阻害するが、cIIの分解には影響を与えないことから、膜蛋白質と細胞質蛋白質は異なる過程でFtsHに分解されることを提唱した。また、HflKCとYccAとの相互作用を調べ、HflKCが「基質」結合能を持つことを明らかにした。精製蛋白質を用い、FtsHか変性したアルカリ性ホスファターゼ(PhoA)やSecY結合するがフォールデイングしたnative PhoAは結合したないこと示し、FtsHが変性蛋白質結合能を持つことを明らかにした。さらに、FtsHがATP依存的に構造変化を起こすなど分子シャペロンと類似した機能を持つことを示した。

FtsH is the most important factor for protein stability and protein purification. FtsH is the most important factor for protein decomposition. FtsH complex plays an important role in regulating the activity of membrane protein complex HflK·HflC. hflKC has different membrane protein decomposition and regulation functions, hflKC has different membrane protein decomposition and regulation functions. Secy decomposition incomplete heterosis analysis new FtsH matrix membrane protein YccA Different types of YccA and Foa can inhibit the decomposition of FtsH, which can affect membrane protein and cytoplasmic protein. The interaction between HflKC and YccA is modulated, and the binding energy of HflKC and "matrix" is maintained. Refined protein binding activity, FtsH binding activity. The structure of the ATP depends on whether the molecule is active or not.