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バイオアッセイによるヒト基本エンハンサーの探索と網羅的cDNAの機能解析法の開発

通过生物测定寻找人类碱性增强子并开发全面的cDNA功能分析方法

基本信息

批准号：
10168205
负责人：
西郷薫
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトのゲノム構造解析の結果、莫大な数の遺伝子のコーデイング情報が得られるが、このことは、必ずしも遺伝子の生物学的機能が分かった事を意味していない。本研究では、ヒト及び他の脊椎動物の位置情報遺伝子hedgehogや幾つかの転写制御遺伝子をショウジョウバエを用いてアッセイし、ヒト/ハエ・アッセイ系の問題点、可能性及び限界を探った。hedgehogは、無脊椎動物から脊椎動物に至る生物の形態形成において基本的な役割を果たす遺伝子である。最初に、ヒトの3つのhedgehogのゲノム配列を決め、次いでhedgehogゲノムDNA断片をUASベクターの下流につなぎ、それを持つトランスジェニックバエを作った。また、別途ショウジョウバエhedgehog遺伝子エンハンサーを解析し、複眼特異的エンハンサー、bar3エンハンサー、を特定し、その下流にGal4をつなぎ、そのtransgeneを持つトランスジェニックバエをつくり、更にUASバエと交配させた。bar3変異の背景で10ライン以上のUAS形質転換体について調べたが、いずれにおいてもbar3変異は全くrescueされなかった。一方、別の活性測定法で、Xepopusのhedgehog遺伝子は、逆の結果を与えた。ホメオボックス遺伝子、bHLH-PAS遺伝子についても類似実験を行ったが、少なくとも強制発現の結果からは、これらの遺伝子は、ショウジョウバエのhomologの代わりとして機能できることが示唆された。遺伝子の時間的空間的発現は、エンハサーにより制御されている。ヒトのShhのエンハンサー活性が、ハエで調べられるかどうかを調べた。ヒト遺伝子の第一、二イントロンにハエでのエンハンサー活性があることが認められた。ハエのhedgehogは、胚で縞状に発現しているが、同様なゼブラパターンでの発現がヒトエンハンサーを用いても観察された。ハエ特有と思われるストライプ・エンハンサー活性が、何故ヒトにもあるのかは不明であるが、進化的に非常に興味深い結果である。ハエ及びヒトエンハンサーは、共に筋肉で、強い異所的発現を惹起した。

The result of structural analysis of the gene is that there are a lot of genetic information about the gene, and the biological function of the gene is different. This study explores the problems, possibilities and limits of position information vectors hedgehog and control vectors in vertebrate and other species. hedgehog is a species of invertebrate, vertebrate, or morphogenetic organism. First, the first three sets of hedgehog DNA fragments were determined, and then the second set of hedgehog DNA fragments were determined. For example, if you are a child, you can choose a child. If you are a child, you can choose a child. bar3 different background more than 10 degrees of UAS shape change body, middle adjustment, middle adjustment bar3 different complete rescue A prescription, different activity assay, Xepopus hedgehog gene, reverse results and In addition, the HLH-PAS file contains similar files, such as the file name, and the file name. The appearance of time and space of the child is opposite,ヒトのShhのエンハンサー活性が、ハエで调べられるかどうかを调べた。The first and second parts of the film are the first and second parts of the film The hedgehog is the same as the hedgehog, and the hedgehog is the same.ハエ特有と思われるストライプ·エンハンサー活性が、何故ヒトにもあるのかは不明であるが、演化的に非常に兴味深い结果である。The appearance of strong and unusual places is aroused.