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肢形成の分子機構と関連シグナル伝達遺伝子の探索

寻找肢体形成的分子机制及相关信号基因

基本信息

批准号：
12026209
负责人：
西郷薫
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12026209/
关键词：
ショウジョウバエ肢形成ホメオボックス遺伝子受容体 Dfrizzled3 Lim 1 Arrow

项目摘要

ショウジョウバエの肢形成過程の初期に影響する遺伝子としてDfrizzled3(Dfz3)を単離し、それが構造的にはWingless(Wg)の受容体遺伝子、Frizzled(Fz),Drizzled2(Dfz2)のホモローグではあるが、機能的には、Wgシグナリングの負に調節することに関わっていることは、既に述べてある。このDfz3の機能を更に明らかにし、FzやDfz2との関係を調べるために、Dfz2の変異体を単離し、Dfz3とFz、Dfz3とDfz2、さらには三者の同時変異体を作出した。Dfz2は、他のグループから報告された結果と異なり、完全にviable,fertileであり、従って、Dfz2はほとんどの組織で機能的には冗長であると考えられる。Dfz3の欠損株では、Wgのviable,hypomorphic変異の表現型がレスキューされたが、同じWg変異とDfz2変異を組み合わせると反対に致死となった。このことは、Wgの活性が低いときは、Dfz2の欠損だけでWgシグナリング活性が足りなくなること、即ちDfz2は機能的に冗長ではないことを示している。詳細な二重、三重変異株の表現型は、現在調べている途中であるが、現在までの解析では、いずれにおいてもDfz3が、Fz、Dfz2の代わりとして、正常な個体細胞での、Wgシグナリングの正の制御に関わっている証拠は見いだせていない。但し、ptc-Gal4をドライバーとしてUASの下流でDfz3を強制発現すると弱いDll(Wgの標的遺伝子)の発現が出現することがハネ原基で観察されている。Wgシグナリングの新規受容体ArrowのArm蛋白質安定化への影響を培養細胞でRNA interference法を用いて調べた。その結果、Dfz2、Dfz3いずれに依存した系でも、Arrowが存在することが、Arm蛋白質安定化に必須であることが分かった。Arrowの非存在下で、Wgが、Dfz2やDfz3発現細胞表面に結合するかどうかはまだ分かっていない。現在実験しているところである。

The genes that affect the early stages of limb formation of the sikigaju are separated from Dfrizzled3(Dfz3), and the resulting structure is composed of the receptor gene of Wingless(Wg), Frizzled(Fz),Drizzled2(Dfz2), and the function is related to the negative regulation of Wg's sikigaju. Dfz3 functions are different, Fz and Dfz2 function are different, Dfz 3 and Fz function are different, Dfz 3 and Dfz function are different. Dfz 2 Dfz3's defective strain, Wg's viable,hypomorphic phenotype, Dfz2's variant phenotype, Dfz's variant phenotype. The activity of Wg is low, the activity of Dfz2 is insufficient, and the activity of Wg is sufficient. The phenotypes of double and triple variant strains are analyzed in detail, and the phenotypes of double and triple variant strains are analyzed in detail. The phenotypes of Dfz3, Fz and Dfz2 are analyzed in detail. The phenotypes of normal individual cells are analyzed in detail. The phenotypes of Wg are analyzed in detail. However, ptc-Gal4 was found to be the most important factor in the occurrence of Dfz3 in the downstream of UAS. The effect of new regulation of Wg-induced apoptosis on protein stabilization of Arrows in cultured cells was studied by RNA interference. Results, Dfz2, Dfz3, Arrow, and Arm protein stabilization are necessary. In the absence of Arrow, Wg, Dfz2 and Dfz3 appear on the cell surface. Now it's time to go.