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ゼブラフィッシュ初期胚における中枢神経系の前後軸成立機構の解析

早期斑马鱼胚胎中枢神经系统前后轴建立机制分析

基本信息

批准号：
10171211
负责人：
武田洋幸
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10171211/
关键词：
ゼブラフィッシュ神経誘導前後軸 FGF BMP Wnt

项目摘要

神経組織の前後軸形成に関与すると思われる外胚葉の反応能の差(differential competence)は、腹側も含めた胚盤周縁の中胚葉から分泌される後方化因子が関与している(Koshida et al.,1998)。今年度、我々は胚盤周縁部で胞胚期から発現するzebrafish wnt8に注目し、後方化因子として機能し得るかどうかを過剰発現等の手法で解析した。さらに、本年度の研究の過程で、後方神経領域でBMP signalとFGF signalとの拮抗していることが明らかになった。(1) 神経組織の前後軸形成におけるWnt8の役割我々が想定する後方化因子は、過剰発現した場合、前方神経マーカーの発現を抑制して後方神経マーカーの発現を誘導し、そのシグナル経路を阻害した場合は、過剰発現と逆の結果となることが必須の条件である。そこで、Wnt8のRNAの受精卵への顕微注入による過剰発現の神経前後軸への影響を調べた。その結果、過剰発現させると前方神経のマーカーであるotx2の発現の減少と後方神経マーカーであるhoxa-1の発現上昇を誘導することが判明した。しかし、Wnt8過剰発現胚でのhoxa-1の発現は、発現領域が拡大しているものの頭部まで及んでいなかった。また、Wnt8のdominant-negative formの過剰発現も頭部領域の明らかな拡大が見られなかった。以上の結果より、wntシグナルは神経組織の前後軸形成に関与しているものの、胚盤周縁部で発現するWnt8が濃度勾配を形成して前後軸形成に直接関与する可能性は低いと結論された。(2) 後方神経領域におけるBMPとFGFの桔抗関係最近我々は、constitutive active型BMP受容体の過剰発現した胚で、後方神経誘導が阻害されないこと、constitutive active型BMP受容体とdominant negative型FGF受容体を共発現させた場合にはじめて後方神経の発生が阻害されることを観察した。以上の結果はゼブラフィッシュ神経誘導(BMPシグナルの阻害)には2つの経路が存在することを示している。一つは、オーガナイザー因子で細胞外でBMPと結合する。もう一つは、後方神経誘導に関与する胚盤周縁からのFGFで、標的細胞内でBMPシグナルと拮抗する。

The difference between the formation of the anteroposterior axis of the neural tissue and the reaction energy of the ectoderm (differential) competence), the ventral mesoderm contains the periblastoderm and the mesoderm secretes the rearing factors and the sterilization factor (Koshida et al., 1998). This year, we will focus on the blastoderm periembryonic stage and the embryonic stage of zebrafish wnt8, and analyze the functions of the posterior factors and other factors.さらに、This year's research process で、BMP signal とFGF signal とのantagonism していることが明らかになった in the rear area. (1) The anteroposterior axis of the God's organization is formed. Wnt8's Servant cuts me. It is assumed that the rear factor is present. The occasion is the occurrence of the passing of the God's body. The front God's body is suppressed.して后神経マーカーの発appearをinducingし、そのシグナル経路を hinderしたoccasionは, となることがのRequired conditionである.そこで, Wnt8 のRNA の fertilized egg への顕 micro-injection による剰発appears の神経后AXIS への Impact を Adjustment べた. The result of その, the result of passing 剰発appears させると前神経のマーカーであるotx2の発appearのreduceと后神経マーカーであるhoxa-1の発appears to rise をinducing することが知した.しかし, Wnt8 over the 剰発 appear embryo でのhoxa-1 の発appear は, 発 appear the field が拡大しているものの头まで and んでいなかった.また, Wnt8's dominant-negative form の剰発appears in the head area の明らかな拡大が见られなかった. The above results show that the anteroposterior axis of the wnt's tissue is formed in the anterior-posterior axis, and the periphery of the blastoderm is formed. It is found that the concentration of Wnt8 is combined with the formation of the anterior-posterior axis, which is directly related to the low probability and the conclusion. (2) BMP and FGF resistance in the rear area are the most recent ones, constitutive active BMP receptors are present and constitutive The active type BMP receptor and the dominant negative type FGF receptor are both present and blocked in the situation. The results of the above are the existence of the BMP シグナルの hinderance and the existence of the することをshow.一つは, オーガナイザー factor and extracellular BMP and binding する. The もう一つは, the posterior shen 経 induced に switch and the する blastoderm periphery からのFGF で, the target intracellular でBMP シグナルと antagonized する.