新規転写補助因子RMPによる転写制御とHBvX蛋白のトランス活性化

新型转录辅助因子 RMP 对 HBvX 蛋白的转录控制和反式激活

• 批准号: 10173213
• 负责人: 村上 清史
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10173213/
• 关键词: 転写; B型肝炎ウイルス; X蛋白(HBx); トランス活性化; RPB5; TFIIB; RMP; in vitro転写系

RNAポリメラーゼサブユニットRPB5がHBVX蛋白(HBx)と結合し、HBxのトランス活性化に関わる結果(EMBO.J.,1995)をもとに、HBxによる転写装置の修飾機構を検討した。本研究は転写装置と直接相互作用して転写を正又は負に修飾する転写制御の新しい局面を明らかにする研究である。得られた成果は、1)人為的プロモータを用いたin vitro及びin vivo転写系で、HBxは転写活性化能は示さず、転写補助因子能(Coactivator)を示し、種々の異なった転写活性化系にCoactivatorとして機能した。各種変異HBxを用いたcoactivator機能の必須領域はトランス活性化ドメインと一致し、精製はHBxはHeLa核抽出蛋白の内在性転写活性化因子の活性化転写を促進した(J.Biol.Chem.,1998)。これらの結果は、従来からのin vivoで報告されたトランス活性化はcoactivator能の結果であると推定された。2)RPB5結合蛋白がHBxの機能修飾と拮抗することを想定して、RPB5結合蛋白cDNAの単離を行い、新規のRMP(RPB5-mediating protein)を同定した(Mol.Cell.Biol.,1998)。RMPは、TBPやHBxとの結合能は示さず、RPB5と特異的に結合した。RMPの過剰発現はHBxトランス活性化に拮抗し、HBx非存在下で活性化転写を制御するCorepressor活性を示した。これらのRMPの転写抑制効果には、RPB5結合領域が必須であった。これらの結果は、RMPがHBxと機能的な拮抗因子であることを示唆した。

The combination of RPB5HBVX protein (HBx) and the activation of HBV X protein (HBx) in RNA were detected by RT-PCR. The results showed that the results (EMBO.J.,1995) of HBVX protein in RPB5HBVX protein (HBX), HBV-HBVX protein (HBVX), HBV-HBVX protein (HBX), HBV-X protein (HBX), HBV-X protein (HBX), HBV X protein (HBV X), HBV X protein ( In this study, there is a direct interaction between the writing device and the writing device. The results of this paper are as follows: 1) for human-made equipment, the use of in vitro and in vivo writing system, HBx writing activation energy display, write-assisted factor energy (Coactivator) indicator, and two-dimensional writing activation system are used to improve the mechanical performance of Coactivator. For all kinds of HBx, the activation mechanism must be consistent in the field, and the activation factor of HeLa nuclear extractive protein must be enhanced by writing activation factor (J. Biol.Chem.1998). This is the result of the in vivo report. The activation of the coactivator can result in a presumption of error. 2) the RPB5-binding protein HBx machine can modify the antagonistic receptor antagonist, the RPB5-binding protein cDNA isolator, and the new specification RMP (RPB5-mediating protein) homology assay (Mol.Cell.Biol.,1998). The combination of RMP, RPB5 and HBX can show the combination of TBP and TBPHBx. RMP filter shows that HBx activation is antagonistic and Corepressor activity is sensitive to Corepressor in the absence of Corepressor. If you want to check the RMP write suppression result, the RPB5 combination domain must be checked. The results of the experiment and the antagonistic factor of RMP HBx mechanism indicated that it was instigated.

项目成果

Nomura, T., Murakami, S.: "Human Hepatitis B virus X protein is detectable in nuclei of transfected cells and active for transactivation." Biochim.Biophys.Acta.in press. (1999)

Nomura, T.，Murakami, S.：“在转染细胞的细胞核中可检测到人乙型肝炎病毒 X 蛋白，并且具有反式激活活性。”

村上清史: "B型肝炎ウイルスの遺伝子発現制御(印刷中)" メデイコピア, (1999)

Kiyoshi Murakami：“乙型肝炎病毒基因表达的调节（正在印刷中）”Medicopia，（1999）

Dorjsuren, Murakami, S.et al.: "RMP, a novel RNA polymerase II subunit 5-interacting protein, counteracts transactivation by hepatitis B virus X protein." Mol.Cell.Biol.,. 18. 7546-7555 (1998)

Dorjsuren、Murakami、S. 等人：“RMP 是一种新型 RNA 聚合酶 II 亚基 5 相互作用蛋白，可抵消乙型肝炎病毒 X 蛋白的反式激活。”

村上清史: "B型肝炎ウイルスX蛋白の発現と機能(印刷中)" 生化学, (1999)

村上清：“乙型肝炎病毒X蛋白的表达和功能（印刷中）”生物化学，（1999）

Lin, Y., Murakami, S.et al.: "The HBV X protein is a co-activator of activated transcription that modulates the transcription machinery and distal binding activators." J.Biol.Chem.,. 273. 27097-27103 (1998)

Lin, Y., Murakami, S.等人：“HBV X 蛋白是激活转录的共激活因子，可调节转录机制和远端结合激活因子​​。”