新規転写補助因子RMPによる転写制御とHBV X蛋白のトランス活性化

新型转录辅助因子 RMP 的转录调控和 HBV X 蛋白的反式激活

• 批准号: 11154210
• 负责人: 村上 清史
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11154210/
• 关键词: B型肝炎ウイルス; X蛋白; トランス活性化; RNAポリメラーゼ; RPB5; TFIIB; RMP(RNA mediating protein)転写補助因子

B型肝炎ウイルス(HBV)X蛋白(HBx)は肝細胞がん発症への関与が示唆されている。我々は、RNAポリメラーゼサブユニット5(RPB5)がHBxの宿主標的であることを見い出し、HBxがRPB5、転写基本因子TFIIBとの3者の相互作用し、転写補助活性化能(coactivator)を示すことを見い出した(J.Biol.Chem.,1998)。更にHBxに拮抗する宿主蛋白として、転写抑制補助能(corepressor)を示すRMP(RPB5-mediatingprotein)を同定した(Mol.Cell,Biol.,98)。本年度の研究成果として、1)HBxが標的とするRPB5とTFIIBの相互作用の生物的な機能の解析を酵母細胞系で検討した。その結果、TFIIBのN端及びC端領域は、酵母とヒト間で互換性を示すことを見い出した。またyRPB5V110G(ヒトのcounterpartはV105に相当する)の高温度感受性変異は、yTFIIB又はヒトと酵母のキメラTFIIB(hTFIIB(aa1-47)/yTFIIB(aa58-339)の過剰発現によって形質抑制(phenotypic suppression)を受ける結果を得た。この結果は、酵母細胞とヒトの系でRPB5とTFIIBの機能的な相互作用が認められることが示された。2)RMPの機能的な拮抗因子と推定されたRMPは、細胞質と核に共に見い出された。転写を負に制御する機能にはRPB5結合部位以外に、RMPのC端領域が必要であり、その領域に存在する核移行シグナル(NLS)が必須であった。更にRMPのN端側にRMPの核への移行を干渉する領域が存在することを見い出した。細胞質への滞留に関与する配列はaa81-118内に限定され、この領域はcoiled-coil領域とほぼ一致した。細胞質に滞留する分子機構と核内への移行を促進する因子については、現在検討を進めている。

Hepatitis B virus (HBV)X protein (HBx) plays an important role in the development of liver diseases. The interaction between HBx and RPB5, the basic factor TFIIB, and the coactivator is shown in J. Biol.Chem., 1998)。In addition, host protein, RPB5-mediating protein, which is an antagonist of HBx, is also regulated (Mol.Cell,Biol., 98)。This year's research results include: 1) Analysis of the biological functions of HBx target RPB5 and TFIIB interactions; and 2) Investigation of yeast cell lines. The results show that the N-terminal and C-terminal fields of TFIIB are interchangeable. The high temperature sensitivity variation of yRPB5V110G (corresponding to V105) and the phenotypic suppression of yTFIIB (hTFIIB(aa1-47)/yTFIIB(aa58-339)) were also observed. As a result, the interaction between RPB5 and TFIIB functions in yeast cells was identified. 2) The antagonist of RMP function was putative. The function of negative control is not necessary except for RPB5 binding site, RMP C-terminal field, and nuclear transition unit (NLS) exists in all fields. In addition, the N-terminal side of RMP has the ability to migrate to other regions. Cytoplasmic retention is related to the alignment of aa81-118, and the coiled-coil domain is consistent with the alignment of aa81-118 Cytoplasmic retention of molecular machinery and nuclear migration promotion factors

项目成果

Murakami,S.: "Hepatitis B Virus X protein:Structure,Functions and Biological Roles."Intervirology. 42. 81-99 (1999)

Murakami,S.：“乙型肝炎病毒 X 蛋白：结构、功能和生物学作用。”病毒学。

村上清史: "ウイルス肝炎-最新情報「B型肝炎ウイルス(HBV)の遺伝子制御」"富士レビオ株式会社. 271 (1999)

村上清：“病毒性肝炎 - 最新信息‘乙型肝炎病毒 (HBV) 的基因控制’”Fujirebio Co., Ltd. 271 (1999)

村上 清史: "生化学 第71巻 第11号 B型肝炎ウイルスX蛋白の発現と機能"日本生化学会. 1309-1326 (1999)

Kiyoshi Murakami：“生物化学第71卷第11期乙型肝炎病毒X蛋白的表达和功能”日本生化学会1309-1326（1999）。

Yul, DY. et al.: "Incidence of hepatocellular carcinoma in the transgenic mice expressing hepatitis B virus X-protein"J. Hepatol.. 31. 123-132 (1999)

尤尔，DY。

Nomura, T., et al.: "Human Hepatitis B virus X protein is detectable in nuclei of transfected cells, and active for transactivation"Biochim. Biophys. Acta.. 1453. 330-340 (1999)

Nomura, T. 等人：“在转染细胞的细胞核中可检测到人乙型肝炎病毒 X 蛋白，并且具有反式激活活性”Biochim。