ミトコンドリアDNAのヘテロプラズミー変異解析によるパーキンソン病の遺伝的素因の同定

通过线粒体 DNA 异质性突变分析鉴定帕金森病的遗传易感性

基本信息

批准号：
10176235
负责人：
麻生定光
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10176235/
关键词：
ミトコンドリアパーキンソン病ヘテロプラズミー

项目摘要

パーキンソン病では母系遺伝するケースが報告され、また複合体Iの活性低下が知られている。ひとつの細胞には通常変異mtDNAと正常mtDNAとが混在していて、分裂しない神経細胞では1000個のmtDNAのうち1個変異をおこすと一生その変異蛋白質によるダメージを細胞は蓄積し、さらにいろいろな変異によるダメージの蓄積がパーキンソン病発症の原因のひとつになると考えられる。パーキンソン病患者と対照健常人のmtDNAのヘテロプラズミー変異を定量してその差を明らかにし、mtDNAのヘテロプラズミーがパーキンソン病の遺伝的素因であることを明らかにすることを目的として、血液細胞のmtDNAにおいて微量の変異mtDNAを定量する方法を開発した。変異mtDNAの変異塩基に相補的なヌクレオチドをプライマーの3'側に設定する。正常mtDNAにはプライマーの3'側で塩基対合できないので、PCRでは増幅されない。ABI Sequence Detection Systemを用いてPCR産物を定量した。プライマーの設計とPCRの条件を検討することで、0.1%以下の含量の変異mtDNAを検出することが可能となった。臍帯血、20歳代、40-60歳、60歳以上と分けた各年代50-100人の全血から調製された全DNAを試料として調べた結果、老化にともないmtDNAの体細胞変異が蓄積することがわかった。神経細胞においても、老化にともない変異mtDNAが蓄積し、その結果神経細胞の機能が損なわれることが考えられた。

帕金森氏病已经报道了母亲的遗传，众所周知，复杂的I活性已减少。一个细胞包含正常mtDNA和正常mtDNA的混合物，在不分裂的神经元中，如果发生1,000 mtDNA突变之一，则该细胞会在其余生中累积突变蛋白的损害，并且认为由各种突变引起的损害的积累可能是帕克森氏病的引起的一种。我们开发了一种方法来量化血细胞中mtDNA中的异质突变，目的是通过量化帕金森氏病患者MTDNA的杂质突变和健康对照组的杂质突变来量化mtDNA的差异，并阐明mtDNA中mtDNA的遗传倾向。与突变体mtDNA突变碱基互补的核苷酸将底漆设置为3'。正常mtDNA不能在底漆的3'侧配对，因此不会放大PCR。使用ABI序列检测系统对PCR产物进行定量。通过检查引物设计和PCR条件，可以检测出含量小于0.1％的突变mtDNA。作为样本，检查了由脐带血全血，20多岁，40-60岁和60岁以上的50-100人制备的总DNA，并发现MTDNA中的体细胞突变因衰老而累积。据认为，突变mtDNA也会在神经元中积聚为衰老，从而导致神经元功能受损。

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Seika Ito: "Functional integrity of mitochondrial genomes in human platelets and autopsied brain tissues from elderly patients with Alzheimer's disease." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.in press. (1999)

Seika Ito：“人类血小板和老年阿尔茨海默病患者尸检脑组织中线粒体基因组的功能完整性。”

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

太田成男: "ミトコンドリア病" 臨床化学. 12. 180-190 (1998)

N. Ota：“线粒体疾病”临床化学 12. 180-190 (1998)。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Shigeo Ohta: "Pore-Forning Structure and Bifunction of the Pro-Apoptotic Factor, Bax." Apoptosis ; its roles and mechanism (editd by Yamada,T. and Hashimoto,Y.), Business Center for Academic Societies Japan. 65-84 (1998)

Shigeo Ohta：“促凋亡因子 Bax 的毛孔形成结构和双功能。”

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

太田成男: "Alzheimer病とミトコンドリア異常" Annual Reviw 神経-変性疾患(後藤文男,高倉公朋,木下真男,柳澤信夫,清水輝男編集),中外医学社. 237-243 (1998)

Shigeo Ota：“阿尔茨海默病和线粒体异常”神经退行性疾病年度评论（由 Fumio Goto、Kimitomo Takakura、Masao Kinoshita、Nobuo Yanagisawa 和 Teruo Shimizu 编辑），Chugai Igakusha 237-243 (1998)。