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ジヒドロリポアミド・サクシニル転位酵素遺伝子由来ペプチドによる神経細胞死制御機構

二氢硫辛酰胺琥珀酰转移酶基因肽的神经细胞死亡控制机制

基本信息

批准号：
12031226
负责人：
麻生定光
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ジヒドロリポアミド・サクシニル転移酵素(DLST)はミトコンドリアに存在するクエン酸回路の律速酵素α-ケトグルタル酸脱水素酵素複合体の構造的中核をなす構成成分のひとつである。アルツハイマー病(AD)ではα-ケトグルタル酸脱水素酵素の活性が低下していることが報告されている。我々はこれまでにDLST遺伝子の17個の多型部位を見い出し、その中でエキソン8、イントロン11、イントロン13、エキソン14でAD患者に頻度高く出現する塩基置換を報告した。これらの塩基置換はアミノ酸の変化を伴わない。ラットの骨格筋細胞と肝臓およびヒトHeLa細胞のミトコンドリア画分から抗DLST抗体によって正常DLSTより分子量の小さいsmall DLST(sDLST)を検出し、sDLSTはイントロン7から転写されエキソン8の最初のATGから翻訳され、その翻訳フレームはDLSTと同じであった。AD患者の脳では健常人にくらべsDLSTの発現量が約1/3に減少していた。我々はsDLSTの生化学的機能について検討した。培養細胞のsDLSTの発現を抑制させるために、RNA制限酵素として働くMaxizymeを利用した。Maxizymeはヘテロ2量体として機能する小型リボザイムで、二つの部位のそれぞれが基質mRNAと塩基配列特異的に結合し切断する。標的sDLSTのmRNAは5′端にイントロン7の塩基配列を持っている。sDLSTのイントロン7とイントロン7/エキソン8のjunctionを認識し、切断するMaxizymeを作製した。ヒト神経芽細胞腫にMaxizymeのcDNAを導入し、その発現により、sDLSTの発現がmRNAレベルで1/100程度に減少した細胞を得た。酸化ストレスとして過酸化水素でMaxizyme導入株を処理したところ、親株にくらべに感受性であった。AD患者脳で減少しているsDLSTは神経細胞の酸化ストレスに対する耐性を促していることが示唆され、DLST遺伝子の多型部位の塩基置換がその発現を調節している可能性が考えられた。

The structure of the enzyme complex is composed of the nuclear components of the enzyme enzyme α-deoxyribonucleic acid loop (DLST). The activity of alpha-hydroxylated dehydrin enzyme is low in AD. 17 polymorphic sites of DLST gene were found in the middle, middle, This is the first time I've ever seen a woman. The anti-DLST antibody was found to be a small DLST(sDLST) antibody with a normal molecular weight, and the sDLST antibody was found to be a small DLST(sDLST) antibody with a normal molecular weight. The incidence of DLST in AD patients decreased by about 1/3 compared with healthy people. I am not interested in the biological function of DLST. The expression of sDLST in cultured cells was inhibited by RNA restriction enzymes and the use of Maxizymes. Maxizyme is a small molecule that binds to the substrate mRNA and binds specifically to the substrate mRNA. The target sDLST mRNA is located at the 5′-terminal region of the gene. SDLST's 7/8 junction is recognized, and the Maxizyme is controlled. Maxizyme cDNA was introduced into human embryonic cells, and the expression of sDLST mRNA was reduced by 1/100. Maxizyme is introduced into plants and parents. In AD patients, the decrease in sDLST may be associated with increased tolerance to neuronal acidification, and the possibility of regulating the occurrence of base substitutions in polymorphic sites of DLST genes may be examined.