ジヒドロリポアミド・サクシニル転位酵素遺伝子由来ペプチドによる神経細胞死制御機構

二氢硫辛酰胺琥珀酰转移酶基因肽的神经细胞死亡控制机制

• 批准号: 12031226
• 负责人: 麻生 定光
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12031226/
• 关键词: α-ケトグルタル酸脱水素酵素; 酸化ストレス; ジヒドロリポアミド・サクシニル転移酵素; アルツハイマー; Maxizyme; 過酸化水素

ジヒドロリポアミド・サクシニル転移酵素(DLST)はミトコンドリアに存在するクエン酸回路の律速酵素α-ケトグルタル酸脱水素酵素複合体の構造的中核をなす構成成分のひとつである。アルツハイマー病(AD)ではα-ケトグルタル酸脱水素酵素の活性が低下していることが報告されている。我々はこれまでにDLST遺伝子の17個の多型部位を見い出し、その中でエキソン8、イントロン11、イントロン13、エキソン14でAD患者に頻度高く出現する塩基置換を報告した。これらの塩基置換はアミノ酸の変化を伴わない。ラットの骨格筋細胞と肝臓およびヒトHeLa細胞のミトコンドリア画分から抗DLST抗体によって正常DLSTより分子量の小さいsmall DLST(sDLST)を検出し、sDLSTはイントロン7から転写されエキソン8の最初のATGから翻訳され、その翻訳フレームはDLSTと同じであった。AD患者の脳では健常人にくらべsDLSTの発現量が約1/3に減少していた。我々はsDLSTの生化学的機能について検討した。培養細胞のsDLSTの発現を抑制させるために、RNA制限酵素として働くMaxizymeを利用した。Maxizymeはヘテロ2量体として機能する小型リボザイムで、二つの部位のそれぞれが基質mRNAと塩基配列特異的に結合し切断する。標的sDLSTのmRNAは5′端にイントロン7の塩基配列を持っている。sDLSTのイントロン7とイントロン7/エキソン8のjunctionを認識し、切断するMaxizymeを作製した。ヒト神経芽細胞腫にMaxizymeのcDNAを導入し、その発現により、sDLSTの発現がmRNAレベルで1/100程度に減少した細胞を得た。酸化ストレスとして過酸化水素でMaxizyme導入株を処理したところ、親株にくらべに感受性であった。AD患者脳で減少しているsDLSTは神経細胞の酸化ストレスに対する耐性を促していることが示唆され、DLST遺伝子の多型部位の塩基置換がその発現を調節している可能性が考えられた。

There is an acid loop called tachyzyme alpha-lactamase, which is a complex of acid dehydrase and acid dehydrase. The composition of the intermediate nucleus is known as DLST. The disease (AD) was caused by low activity of acid dehydrase (acid dehydrase). We have reported high levels of DLST in 17 patients with polymorphisms, 8, 11, 13, and 14 patients with AD. I don't know what to do. I don't know. I don't know. The HeLa cells were divided into anti-DLST antibodies, normal DLST, small molecular weight, small DLST (sDLST), sDLST, 7, 8, ATG, DLST, and so on. In patients with AD, the amount of sDLST in normal people is about 1 percent less than that in normal people. We need to sDLST the mechanism of biochemistry to improve the performance of biochemistry. The culture of sDLST showed that it was possible to inhibit the production of enzymes by restriction of RNA production and utilization of Maxizyme. The Maxizyme equipment can be used to measure the combination of the special equipment of the basic mRNA equipment in the small scale equipment and the second part. The sDLST "mRNA" 5 'end of the column supports the base line of "7". SDLST

项目成果

Asoh,S.: "The Super Anti-apoptotic Factor Bcl-xFNK Constructed by Disturbing Intramolecular Polar Interactions in Rat Bcl-xL."J.Biol.Chem.. 275. 37240-37245 (2000)

Asoh,S.：“通过干扰大鼠 Bcl-xL 分子内极性相互作用构建的超级抗凋亡因子 Bcl-xFNK。”J.Biol.Chem.. 275. 37240-37245 (2000)

Nanbu-Wakao,R.: "Bacterial Cell death induced by human pro-apoptotic Bax is blocked by anRNaseE mutant that functions in an anti-oxidant pathway."Genes Cells. 5. 155-167 (2000)

Nanbu-Wakao,R.：“人类促凋亡 Bax 诱导的细菌细胞死亡被在抗氧化途径中发挥作用的 RNaseE 突变体阻断。”Genes Cells。

太田成男: "RNA研究の最前線-RNAと蛋白質の複合機能(志村令郎,渡辺公綱編)"シュプリンガー・フェアクラーク東京. 238 (2000)

Shigeo Ota：“RNA 研究的前沿 - RNA 和蛋白质的复杂功能（由 Reiro Shimura 和 Kimitsuna Watanabe 编辑）” Springer Fair Clark Tokyo 238 (2000)。

Tanabe,T.: "Maxizymes,Novel Allosterically Controllable Ribozymes, Can Be Designed to Cleave Various Substrates."Biomacromolecules. 1. 108-117 (2000)

Tanabe,T.：“Maxizymes，新型变构可控核酶，可设计用于切割各种底物。”生物大分子。

麻生定光: "ミトコンドリアと細胞死."Clinical Neuroscience. 18. 42-44 (2000)

麻生贞光：“线粒体和细胞死亡。”18. 42-44 (2000)