植物の新しい分解コンパートメント「リソソーム」の形態学的解析

溶酶体的形态分析，植物中的一种新的降解区室

• 批准号: 10874125
• 负责人: 森安 裕二
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10874125/
• 关键词: リソソーム; 液胞; 自食作用; プロテアーゼ; オートファジー

1.リソソームをパーコール密度勾配遠心法を用いて単離し,リソソームに存在するタンパク質を電気泳動で分離しウェスタンブロット法により解析した。その結果,リソソームは液胞型ATPaseのAサブユニット・Bサブユニット,酸性ホスファターゼが存在することがわかった。2.計画していた蛍光抗体法,免役電子顕微鏡法によるリソソームと液胞の比較は行わなかった。3.タバコ培養細胞を用いた実験系において,ショ糖飢餓処理に伴って活性化されるシステインプロテアーゼのPCRによるクローニングを試みたが,有意義な結果は得られなかった。4.細胞の形態を光学顕微鏡を用いて詳しく観察し,リソソームが形成されるタイミングを調べた。その結果,リソソームを介した自食作用は一過的にしか起こらないこと,そして,この自食作用が終了した後も細胞内タンパク質分解は進行することを明らかにした。さらに,リソソームを介した自食作用が終了した後に起こるタンパク質分解は,液胞が直接関与する自食作用に依ることを示唆する結果を得た。5.リソソームの形成を阻害する薬剤のスクリーニングを行った。その結果,動物細胞の自食作用の阻害剤である3-メチルアデニンが,リソソームの形成を阻害することを明らかにした。

1. The density of the solution is matched with the distance method, and the solution exists in the mass of the solution. The results of this study were as follows: 1. The enzyme A, B, C, D, E, E, F, G, G. 2. The method of light antibody and electron microscope were used to compare the results of different methods. 3. In the culture system, glucose starvation treatment was accompanied by activation of the enzyme. 4. The morphology of the cells was examined in detail by optical microscopy, and the morphology of the cells was adjusted. As a result, the process of autophagy has been completed and the intracellular degradation has been carried out. After the self-absorption, the liquid cell is directly related to the self-absorption. 5. The formation of the system resistance to the formation of the system As a result, the inhibition of autophagy in animal cells is 3-fold, and the inhibition of the formation of a complex is 3-fold.