炎症急性期に存在する慢性炎症のケミカルメディエーターの研究

炎症急性期存在的慢性炎症化学介质的研究

• 批准号: 10877363
• 负责人: 高野 克彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877363/
• 关键词: 炎症; 増殖因子; 線維芽細胞; MRP-14; ケミカルメディエーター

Rat migration inhibitory factor-related protein 14(MRP-14)が慢性炎症におけるケミカルメディエーターであることを明らかにするために、平成10年度に引き続き、以下に示すような実験を行った。1.組換え体rat MRP-14の作製とその性質:平成10年度までに作製したGST-MRP-14融合タンパク発現ベクターを有する大腸菌より、Glutathione affinityカラム、Thrombinによる融合タンパクの切断、イオン交換カラムの手順により組換え体rat MRP-14を精製した。精製した組換え体rat MRP-14をin vitro細胞培養系に添加し、その線維芽細胞に対する増殖促進活性を検討した。細換え体rat MRP-14は、100ng/ml以上の濃度で、線維芽細胞に対して有意な細胞の増殖を誘導した。今後、平成10年度までに作製した抗rat MRP-14抗血清を用いることで、この組換え体rat MRP-14の線維芽細胞増殖活性が、抑制されるか否かを検討する予定である。2.炎症滲出液の線維芽細胞増殖促進活性の検討:ラット・カラゲニン空気嚢炎症モデルの滲出液より、nativeなrat MRP-14を精製し、完全な一次構造を明らかにすることを最終目的とし、これを効率よく精製するため、本炎症モデルにおいてカラゲニン投与1日後より7日後まで経日的に回収した滲出液の、in vitro細胞培養系における線維芽細胞の増殖促進活性を検討した。その結果、線維芽細胞の増殖がー番活発であると推測される、カラゲニン投与5日後以後の滲出液は、線維芽細胞に対して高い増殖促進活性を示した。このため、nativeなrat MRP-14の精製には、カラゲニン投与5日後の滲出液(Day-5 exudate)を用いることとした。

Rat migration inhibitory factor-related protein 14(MRP-14) is a chronic inflammatory disease. 1. Production and properties of recombinant rat MRP-14: Production and purification of GST-MRP-14 fusion system in Heisei 10: Escherichia coli, Glutathione affinity system, Thrombin system, fusion system, fusion system and purification of recombinant rat MRP-14 To investigate the proliferation promoting activity of recombinant rat MRP-14 in vitro cell culture system At concentrations above 100ng/ml, rat MRP-14 can induce the proliferation of cultured cells. In the future, the use of anti-rat MRP-14 antiserum in the production of rat MRP-14 in the 10th year of Heisei will be determined. 2. Study on proliferation promoting activity of vascular germ cells in inflammatory exudate: To study the proliferation promoting activity of vascular germ cells in exudate, native rat MRP-14 purification, complete primary structure, final purpose, efficiency purification, inflammatory exudate, exudate, native rat MRP-14 purification, native rat MRP-1 The results showed that the proliferation of line cells was promoted by the exudate after 5 days of treatment. The original MRP-14 was used to purify the exudate after 5 days.