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受容体のギランド結合領域を用いた新しいリガンド探索法の開発

使用受体的 Gilland 结合区开发新的配体搜索方法

基本信息

批准号：
10877366
负责人：
伊藤信行
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877366/
关键词：
FGF 受容体リガンドタンパク質

项目摘要

これまでの受容体研究は,既知のリガンドからその特異的受容体を同定し,その構造と機能が調べられてきた。しかし,近年,遺伝子組換え技術の進歩により,構造上の類似性を指標にして,多くの受容体遺伝子が単離されつつある。これらの受容体の多くは,リガンド及び生理的役割が不明な受容体(Orphan受容体)である。特に,チロシンキナーゼ型受容体にはorphan受容体が多く見い出されている。このようなOrphan受容体の生理的役割を解明するには,そのリガンドを明らかにする必要がある。そのため,リガンド探索のための新しい手法の開発が望まれている。申請者は構造と機能が比較的よく明らかにされているFGF受容体をモデルとして研究を進めた。FGF受容体リガンド結合ドメインのみをコードするcDNAをバキュロウイルスの高発現ベクターに組込んだ組換えベクターを昆虫細胞で発現させた。発現された細胞外ドメイン.は効率よく細胞外に分泌された。この細胞外ドメインタンパク質をアフィニテイカラムクロマト法により精製した。精製タンパク質をSDSポリアクリルアミド電気泳動法により,純度を検定したところ,分子量53kDaの均一なタンパク質が観察された。従って,純粋な細胞外ドメインタンパク質が調製されたと判断される。さらに,この細胞外ドメインタンパク質のリガンド結合活性をBIA COREを用いて検討したところ,FGFを効率良く結合することが明らかになった。この組換えリガンド結合ドメインタンパク質は新しいリガンド探索のための有用なプローブになることを明らかにした。

Since it is known that the capacity of the recipient is the same as that of the capacitor, it is known that the capacitor is the same, and that the machine can be used for the purpose of the research. In recent years, the technology of the sub-organization has been improved, the similarity index has been created, and the recipients have been separated from each other. There are multiple receptacles, multiple receptacles, and physiologically unknown receptacles (Orphan receptors). Special attention is given to the type of receptacle, the type of orphan, the number of recipients, and the number of recipients. The physiology of the Orphan recipient is cut off to understand the nature of the disease. We are looking forward to exploring new ways to improve the quality of life. The applicant is able to improve the research of the FGF recipient through the application of the machine. The FGF acceptor was used in combination with the cDNA receptor to detect the disease in the insect cell. We can see that there are some extracellular symptoms. The rate of extracellular secretion is very high. In addition, the extracellular drug was used to treat the disease. The precision of the method is that the temperature is determined by the temperature, the temperature is determined by the temperature, and the molecular weight of 53kDa is determined by the temperature and molecular weight of 53kDa. I don't know, I don't know. In combination with active BIA CORE, the positive rate of FGF was measured in combination with the positive rate of ECM. This is a good example of how to make sure that you can learn more about the situation.