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新しい分泌性シグナル分子,fringe,の発現と生理的役割の解明

阐明新的分泌信号分子边缘的表达和生理作用

基本信息

批准号：
11159102
负责人：
伊藤信行
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11159102/
关键词：
fringe glycosyltransferdse signal geme

项目摘要

fringeはDrosophilaのwingの形成過程で重要な役割を果たしている新しい分泌性シグナルである。我々はラットradical fringe,lunatic fringe cDNAを単離し,その構造を明らかにした。さらに,これらのfringeの発現の組織特異性を調べたところ,radical fringe,lunatic fringeはそれぞれ,脳と肺に高発現していることが明らかになった。さらに,脳内のradical fringeの発現をin situ hybridization法で調べたところ,radical fringeは脳内の神経細胞に広範囲に発現していた。radical fringeの脳内における役割を明らかにするため,baculovirus発現系を用いて昆虫細胞で組み換えradical fringeを作成した。組み換えradical fringeは昆虫細胞膜に結合していたが,界面活性剤により容易に可溶化した。可溶化した組み換えradical fringeをニッケルアフィニティーカラムにより精製した。精製組み換えradical fringeの生物活性は,初代培養ラット神経細胞を用いて調べた。ラット胎児の脳より,神経細胞を分散させ初代培養神経細胞を培養した。fringeはNotchシグナル系を阻害すると推定されている。従って,Notchシグナル系のどの段階で作用しているかを検討した。神経細胞のNocthリガンド,Notch受容体,Notch細胞内シグナルであるHesの発現量の変化を調べた。radical frngeは神経細胞のHes-1の発現を特異的に阻害していることが明らかになった。Hes-1は神経細胞の分化過程に重要な役割を果たしていることが明らかにされている。従って,radical fringeも神経細胞の分化過程で重要な役割を果たしているものと期待される。

Fringe is important in the formation of Drosophila wing. We have isolated the radical fringe and lunatic fringe cDNA, and the structure is clear and clear. In addition, the development of this fringe is tissue-specific,radical fringe,lunatic fringe is highly developed. In addition, the radical fringe in the brain is found in situ hybridization. Baculovirus is a radical fringe that is produced by insect cell assembly. The radical fringe binds to the insect cell membrane, and the interfacial active agent dissolves easily. Dissolved radical fringe The biological activity of the purified radical fringe is regulated by the use of primary cultured neurons. In the early stages of development, neurons were dispersed and cultured. Fringe Notch is the most common form of interference. The Notch System is a multi-level system that functions as a multi-level system. It regulates the changes in the amount of Nocth ligand,Notch receptor, and Hes found in Notch cells. Radical frnge is a specific inhibitor of Hes-1 development in neurons. Hes-1 plays an important role in the differentiation of neurons. The radical fringe plays an important role in the differentiation of neurocytes.