新規な分泌性形態形成因子遺伝子の探索とその役割の解明

寻找新的分泌形态发生因子基因并阐明其作用

• 批准号: 20659010
• 负责人: 伊藤 信行
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659010/
• 关键词: 分泌性因子; 形態形成; 遺伝子; ゼブラフィッシュ; マウス; BMP; アンタゴニスト; 脳; 遺伝子機能抑制

研究代表者はDNAデータベースの遺伝子情報から分泌性シグナル配列を指標にして、ヒト、マウス、ゼブラフィッシュに共通して発現する新規な分泌性因子遺伝子を網羅的に探索した。さらに、新規な分泌性形態形成因子遺伝子の発見を目指した一次スクリーニングとして、ゼブラフィッシュを用いた遺伝子機能抑制実験により個体レベルで形態形成に異常を示す遺伝子を探索するとともに、その役割の分子メカニズムの解明を目指した。1) ヒト、マウス、ゼブラフィッシュ分泌性因子遺伝子の探索DNAデータベースにあるヒト、マウス、ゼブラフィッシュの機能不明な遺伝子がコードしていると期待されるアミノ酸配列を無作為に選択し、PSORT(a computer program for the prediction of protein localization sites in cells)などのアミノ酸配列ソフトを活用して新規な分泌性因子遺伝子を探索した。さらに、これらの遺伝子の内、遺伝子のhomology解析をして酵素遺伝子である可能性のある遺伝子は除くとともに、ヒト、マウス、ゼブラフィッシュに共通に発現している遺伝子を絞り込んだ。2) ヒト、マウス、ゼブラフィッシュ分泌性因子遺伝子の単離上記により同定された遺伝子が実際に発現しているかを確認するため、ヒト、マウス、ゼブラフィッシュcDNAを鋳型にし、PCRで遺伝子を増幅し、その遺伝子の配列を確認した。さらに、その増幅された遺伝子はベクターDNAを用いてクローニングした。3) 分泌性因子遺伝子のマウス、ゼブラフィッシュ胎児期における発現の検討様々な発達段階にあるマウス、ゼブラフィッシュ胎児における分泌性因子遺伝子の発現をwhole mount in situ hybridizationやsection in situ hybridization法により調べた。その発現様式から興味深い発現様式を示す遺伝子を絞り込んだ。

Research representatives は DNA デ ー タ ベ ー ス の heritage 伝 child intelligence か ら secretory シ グ ナ ル go を index に し て, ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に common し て 発 now す る new rules な secretory factors but 伝 son を snare に explore し た. さ ら に, new rules な secretory morphogenetic factor heritage 伝 son の 発 see を refers し た a ス ク リ ー ニ ン グ と し て, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ を with い た heritage 伝 sub function inhibition be 験 に よ り individual レ ベ ル で morphogenetic に abnormal を shown す heritage 伝 son を explore す る と と も に, そ の service cut の molecular メ カ ニ ズ ム の interpret を refers し た. 1) ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ secretory factors heritage 伝 son の explore DNA デ ー タ ベ ー ス に あ る ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ の function unknown な heritage 伝 son が コ ー ド し て い る と expect さ れ る ア ミ ノ acid with column を inaction に sentaku し, PSORT (a computer program For the prediction of protein localization sites in cells) な ど の ア ミ ノ acid with column ソ フ ト を use し て new rules な secretory factors heritage 伝 son を explore し た. さ ら に, こ れ ら の posthumous son 伝 の inside, but 伝 の homology parsing を し て enzyme heritage 伝 son で あ る possibility の あ る posthumous son 伝 は except く と と も に, ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に common に 発 now し て い る heritage 伝 son を ground り 込 ん だ. 2) ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ secretory factors heritage 伝 son の 単 from written に よ り with fixed さ れ た posthumous son 伝 が be interstate に 発 now し て い る か を confirm す る た め, ヒ ト, マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ cDNA を type where に し, PCR で heritage 伝 を raised し picture, そ の heritage 伝 の match sequence を confirm し た. さ ら に, そ の rights of さ れ た posthumous son 伝 は ベ ク タ ー を DNA with い て ク ロ ー ニ ン グ し た. 3) secretory factors heritage 伝 son の マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ fetal stage where に お け る 発 の now beg others 検 々 な 発 da Duan Jie に あ る マ ウ ス, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ tire where に お け る secretory factors heritage 伝 son の 発 を now whole mount in situ hybridization や section in situ hybridization method によ べた adjustment べた. Youdaoplaceholder0 the appearance pattern of そ is ら and is very interesting. The appearance pattern of を shows す remains 伝 を twisted 込んだ.

项目成果

Neucrin is a novel neural-specific secreted antagonist to canonical Wnt signaling

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2009.10.113
• 发表时间: 2009-12-18
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Miyake, Ayumi;Takahashi, Yohsuke;Itoh, Nobuyuki
• 通讯作者: Itoh, Nobuyuki

Brorin, a novelsecreted BMP antagonist, prom otes neurogenesis in mouse neuralprecursor cells

Brorin 是一种新型分泌型 BMP 拮抗剂，可促进小鼠神经前体细胞的神经发生

• 发表时间: 2009
• 期刊: J. Biol Chem. 282
• 作者: H.Miwa;et al.;北村尚也・松本舞・南直治郎・山田雅保・今井裕;北村尚也・宮本圭・松本舞・南直治郎・山田雅保・今井裕;N. Koike
• 通讯作者: N. Koike

Neurotrophic activity of neudesin, a novel extracellular heme-binding protein, is dependent on the binding of heme to its cytochrome b5-like heme/steroid-binding domain

• DOI: 10.1074/jbc.m706679200
• 发表时间: 2008-02-15
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kimura, Ikuo;Nakayama, Yoshiaki;Fujimoto, Masafumi
• 通讯作者: Fujimoto, Masafumi