Reverse footprint - Analyse der Kontakte in DNA-Protein-Komplexen

我们已经采用了反向足迹技术，MIT Deren Hilfe De Aminosäurerust eines Eines蛋白质被识别，De Diekt and der Wechselwirkung eines蛋白质MIT seinem Spezifischen DNA底物之间的相互作用。在GTP-BZW的基础上，MIT Dieser Technik die DNA-BindungsRegion Verschiedener Nukleasen im Detail zu characterisieren，inbedisondere der der GTP-ABHänGigen McrBC Restrikense and DEM ATP-ABHänigen MutHLS DNA-Reparaturursystem，die bebebebebebeidylierte bzw.hemimylierte DNA erkennen and die DNA in GTP-BZW。三磷酸腺苷-水解性裂解蛋白。我们把光交联物从蛋白质中分离出来，从DNA中分离出来，从另一个角度来看，这是一种新的方法。用脉冲式流动装置进行了大足的光交联实验。在这两种情况下，我们发现了一种新的基因，一种新的基因，一种新的基因。

Wir haben eine sogenannte reverse footprint Technik etabliert, mit deren Hilfe die Aminosäurereste eines Proteins identifziert werden können, die direkt an der Wechselwirkung eines Proteins mit seinem spezifischen DNA-Substrat beteiligt sind. Es ist beabsichtigt, mit dieser Technik die DNA-Bindungsregion verschiedener Nukleasen im Detail zu charakterisieren, insbesondere bei der GTP-abhängigen McrBC Restriktionsendonuklease und dem ATP-abhänigigen MutHLS DNA-Reparatursystem, die beide methylierte bzw. hemimethylierte DNA erkennen und die DNA unter GTP-bzw. ATP-Hydrolyse spalten. Wir wollen mit Hilfe von laserinduzierten photocrosslinks die Regionen der Proteine sondieren, die sich im direkten Kontakt mit der DNA befinden und eruieren, wieweit sich diese Kontakte im Zuge der Reaktion, an der mehrere Komponenten beteiligt sind, verändern. Dazu sollen unter Verwendung einer pulsed flow Apparatur auch zeitaufgelöste photocrosslink Experimente durchgeführt werden. In diesem Zusammenhang soll auch geklärt werden, wie sich McrBC bzw. MutHLS während der Reaktion auf der DNA bewegen, um von der initialen Erkennungstelle zu der weit entfernten Schnittstelle zu gelangen.