Enzymologie des GTP-abhängigen Restriktionssystems McrBC aus E. coli K-12

McrBC, ein Protein，大肠杆菌（Escherichia coli），原核（Prokaryonten），幽门螺杆菌（Helicobacter nachgewiesen wurde），甲基化（methylliter） dna序列催化（methylliter），甲基化（stellt die bisher einzige rektionsendonuklease dar），甲基化（deren Aktivität libat）， gtp - hydrolypelt ist。他最好的工作是在实验室，McrB和McrC，在Komplexen mit höherer，晚上geklärter Stöchiometrie beder DNA-Spaltung kooperieren。McrB的翻译结果：1 . McrB的翻译结果：1 . McrB的翻译结果：1 . McrB的翻译结果：McrC könnte die f<e:1> r die DNA-Spaltung verantwortliche katalytische Untereinheit sein。不确定的是，我们会把GTP放在DNASpaltung spielt上。[1] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0]Ziel unserer Untersuchungen ist es, and Zusammenhang von gtp - binding and - hydrolyseits and dna - binding and -Spaltung anderseits in molecular Detail auzuklären。[3] [3] [3] [3] [3] [3] [1] [3] [1] [3] [1] [3] [4] [1] [4]

McrBC, ein Protein, das außer in Escherichia coli auch in anderen Prokaryonten wie Helicobacter pylori nachgewiesen wurde und das die Spaltung bestimmter methylierter DNA-Sequenzen katalysiert, stellt die bisher einzige Restriktionsendonuklease dar, deren Aktivität obligat an GTP-Hydrolyse gekoppelt ist. Es besteht aus zwei Untereinheiten, McrB und McrC, die miteinander in Komplexen mit höherer, noch nicht geklärter Stöchiometrie bei der DNA-Spaltung kooperieren. McrB ist verantwortlich für die DNA-Erkennung sowie für GTP-Bindung und Hydrolyse. McrC könnte die für die DNA-Spaltung verantwortliche katalytische Untereinheit sein. Unklar ist, welche Rolle GTP bei der DNASpaltung spielt. Es könnte für die Bildung hochmolekularer Komplexe verantwortlich sein, alternativ für die Einstellung einer aktiven McrB-Konformation oder für gerichtete Bewegung auf der DNA. Ziel unserer Untersuchungen ist es, den Zusammenhang von GTP-Bindung und -Hydrolyse einerseits und DNA-Bindung und -Spaltung andererseits im molekularen Detail auzuklären. Dazu sollen strukturelle, thermodynamische und kinetische Aspekte der GTP-Bindung und -Hydrolyse untersucht und in einen Zusammenhang mit den Teilprozessen der DNA-Bindung und -Hydrolyse gebracht werden.