Enzymologie des GTP-abhängigen Restriktionssystems McrBC aus E. coli K-12

大肠杆菌 K-12 的 GTP 依赖性限制系统 McrBC 的酶学

• 批准号: 5230960
• 负责人: Professor Dr. Alfred Pingoud (†)
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5230960?language=en
• 关键词: Enzymologie; des; GTP; abh; ngigen

McrBC, ein Protein, das außer in Escherichia coli auch in anderen Prokaryonten wie Helicobacter pylori nachgewiesen wurde und das die Spaltung bestimmter methylierter DNA-Sequenzen katalysiert, stellt die bisher einzige Restriktionsendonuklease dar, deren Aktivität obligat an GTP-Hydrolyse gekoppelt ist. Es besteht aus zwei Untereinheiten, McrB und McrC, die miteinander in Komplexen mit höherer, noch nicht geklärter Stöchiometrie bei der DNA-Spaltung kooperieren. McrB ist verantwortlich für die DNA-Erkennung sowie für GTP-Bindung und Hydrolyse. McrC könnte die für die DNA-Spaltung verantwortliche katalytische Untereinheit sein. Unklar ist, welche Rolle GTP bei der DNASpaltung spielt. Es könnte für die Bildung hochmolekularer Komplexe verantwortlich sein, alternativ für die Einstellung einer aktiven McrB-Konformation oder für gerichtete Bewegung auf der DNA. Ziel unserer Untersuchungen ist es, den Zusammenhang von GTP-Bindung und -Hydrolyse einerseits und DNA-Bindung und -Spaltung andererseits im molekularen Detail auzuklären. Dazu sollen strukturelle, thermodynamische und kinetische Aspekte der GTP-Bindung und -Hydrolyse untersucht und in einen Zusammenhang mit den Teilprozessen der DNA-Bindung und -Hydrolyse gebracht werden.

McrBC、Ein蛋白、das auer在原核细胞中表达，而幽门螺杆菌则与DNA序列同源性较高，必须进行GTP水解酶。这是Aus zwei Untereinheiten，McrB和MCRC，在Komplexen MIT Hitöherer，noch nchht geklärter stöchistre be der DNA-Spaltung koperieren。McrB is verantwortlich für die DNA-Erkennung Sowie für GTP-Bindung and Alkennung Sowie für GTP-Bindung and Alkennung.MCRC könnte die für die DNA-Spaltung verantwortliche katalytische Untereinheit sein.不知道怎么回事，我不知道怎么回事。Ees könnte für die hochmolekuleller Komplexe verantwortlich sein，Alternativ für die Einstellung einer aktiven McrB-Konformationoder für gerichtete Bewegung auf der DNA。在此基础上，我们找到了GTP-Bindung-Bindung和DNA-Bindung-Spaltung的水解酶，并对其进行了详细的分析。在Einen Zusammenang MIT den Teilprozessen der DNA-Bindung and-水解gbrht中，我们进行了热力学和动力学研究。