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末端酸化酵素の基質酸化特異性とプロトン輸送能の研究

末端氧化酶底物氧化特异性和质子转运能力的研究

基本信息

批准号：
11116224
负责人：
曽根専史
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyushu Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸菌のbo型オキシダーゼや好熱性細菌caa3型オキシダーゼはSoxM型に属し、プラトン輸送活性を持つ。一方、SoxB型のもののアミノ酸配列の保存性はややひくいので、これらの型のオキシダーゼのについて次の研究をおこなった。1。好熱性バシラス属細菌はcaa3型オキシダーゼとbo型のキノールオキシダーゼ以外にSoxB型に属するbo3型シトクロムcオキシダーゼを持つが、その存在量はすくない。B.stearothermophilus野生株K-1041に酵素のオペロンを持つプラスミドを形質転換したところ1-2nmol/mg proteinの本酵素が発現された。これをDEAEセルロースとハイドロキシアパタイトカラムにより純粋にした。2。このbo3型オキシダーゼを大豆リン脂質と共にリポソーム小胞に再構成し、還元型シトクロムc-551を小量加えたところ、低いながらもH+ポンプ活性を検出することができた。3。一方、caa3型シトクロムオキシダーゼbd型キノールオキシダーゼの両方を欠くmutantではこのbo3型オキシダーゼが主に働いているので、この休止菌を用いて嫌悪的条件でO2パルスをすることにより、H+/0を測定したところ5.0-5.3となった。これは野生株のそれ(6.0-6.5)よりやや低いが、4.0までは低下しないので、bo3型オキシダーゼは効率はひくいながらプロトンポンプであることが判明した。4。bo3型オキシダーゼのESRスペクトルはCuAと高スピンヘムOと低スピンヘムBがSoxM型のオキシダーゼのものと類似している。またこのCuAに由来するg=2付近の微細装置はこの銅原子がN2O還元酵素と共通する構造を持つことを示した。RRスペクトルはヘムOが高スピン型、ヘムBが低スピン型であることを示すとともに、Feに配位するCOの配置がやや異なることを示した。5。プラスミド上の遺伝子に部位特異性変異を導入してそれを発現して得た変異蛋白質を作成した。

Coliform bo-type bacteria caa3-type bacteria caa3-type bacteria caa4-type bacteria caa3-type bacteria caa4-type bacteria caa3-type bacteria caa4 bacteria caa3-type bacteria caa4 bacteria caa3-type bacteria ca A study on the preservation of acid sequences of SoxB type and SoxB type 1。The thermophilic bacteria belong to caa3 type, bo3 type, and soxB type. B.Stearothermophilus wild strain K-1041 enzyme selection process to maintain the quality of the enzyme to 1- 2 nmol/mg protein was developed This is the first time I've ever seen a girl. 2。This is the third type of protein that can be used to reconstitute the lipid and protein groups of soybean cells, and the third type of protein that can be used to reconstitute the protein groups of soybean cells. 3。A, caa3 type, b, d type, c, d type, d type, d, d type, d, d type, d type, d, d, d type, d, d This is the first time that the Chinese government has made a decision on the issue. 4。Bo3-type ESR is similar to A and B. The origin of CuA and the structure of N2O reduction enzyme in the vicinity of micro-devices are shown. RR: O: High level, B: Low level, C: High level, D: High level, C: High level, D: High level, D: High 5。The site-specific protein was introduced into the genome and produced.