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SCDaseを用いた糖脂質工学とスーパー糖脂質分子の創製

使用 SCDase 进行糖脂工程和超级糖脂分子的创建

基本信息

批准号：
11121225
负责人：
伊東信
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

糖脂質の脂肪酸部分は不均一性を示す。そこで、SCDaseを用いて糖脂質から脂肪酸を切り離した後、縮合反応を用いて目的の脂肪酸分子種を導入し、分子種をそろえた糖脂質の作成を試みた。反応効率は異なるもののリゾGM1やGalSphにC6:0からC24:0の飽和脂肪酸を導入することが可能であった。さらに、C18:1,C18:2,C18:3ハ等の不飽和脂肪酸を導入することができた。逆反応を利用して、[^<14>C]標識した種々の糖脂質やスフィンゴミエリン及びセラミドを高収率で作製する方法を確立した。この高感度セラミドを用いて、微生物で初めてセラミダーゼを発見することができた。この細菌由来のセラミダーゼは、SCDaseとは異なり糖脂質には全く作用しない。一方、SCDaseを用いてアミノ脂肪酸あるいはDHAやEPAなどをリゾスフィンゴ脂質に導入できることも確認している。前者は、スフィンゴ脂質にNBDやダンシル等の蛍光標識の導入を可能にし、後者は機能性高度不飽和脂肪酸を組み込んだスーパーガングリオシドの創製につながる。このように、SCDaseはスフィンゴ脂質から脂肪酸を切り離す「はさみ」の機能と新しい脂肪酸をリゾスフィンゴ脂質に導入する「のり」の機能を合わせ持ち、条件を選ぶことでこれら2つの反応を使い分けることができる。本法によって、スフィンゴ脂質の脂肪酸部分の変換や標識が簡単に行える。従来の化学的な方法に比べて収率や簡便さにおいて格段に優れているばかりでなく、今まで不可能であった例えばポリシアロガングリオシド等にも適用できるので、今後スフィンゴ脂質研究において広く使われることになるだろう。

The heterogeneity of glycolipids, fatty acids and fatty acids is shown. After the fat fat was cut with glycolipid fat fat, the molecular weight of fatty acid was imported into SCDase, and the glycolipid was used to make the test. The rate of exposure is different from that of GM1, GalSph, C6R, C24, and fatty acids. No and fatty acids such as "no" and "fatty acid", such as "no", "C18VR", "C18VR" and "no" and fatty acids are added to the diet. The reverse strategy is to make sure that it is established by using several kinds of glycolipid, [^ & lt;14>C] tags, such as glycolipid, glycolipid, and the high rate of high temperature. High sensitivity, microbes, microbes The origin of the fungus is the cause of the disease, and the whole action is caused by the sugar and lipid in the whole body. On the one hand, SCDase confirmed that the fat was not available by using DHA, EPA, fatty acids, fat, fat and fat. The former is sensitive to NBD, and the latter is highly functional and the fatty acid system is sensitive. The new fatty acids can be added to the new fatty acids. The fatty acids can be added to the system. If you choose the condition, you can choose the optimal temperature to make the fractionation system work. In this method, the fatty acid content of the fatty acid section is higher than that of the control group. The chemical method is better than that of the chemical method, and it is not possible to use the chemical method to study the fat in the future.