細胞分裂期におけるプロテインホスファターゼ2Aの機能

蛋白磷酸酶2A在细胞分裂过程中的功能

• 批准号: 11143210
• 负责人: 田邉 修
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11143210/
• 关键词: プロテインホスファターゼ2A; 調節サブユニット; B'サブユニット; 分裂酵母; 遺伝子破壊株; 細胞質分裂; 染色体分配; 細胞形態

プロテインホスファターゼ2A(PP2A)は,触媒サブユニットCと調節サブユニットAとが結合したヘテロ2量体,あるいはこれに調節サブユニットのB,B',またはPR72が結合した3量体として存在する。分裂酵母をモデル生物として用いてB'サブユニットの機能解析を行った。分裂酵母より2種類のB'ホモログを見いだし,その遺伝子(pbp1^+,pbp2^+)の破壊株を作成した。pbp1^+遺伝子破壊株(Δpbp1)では,低温および高温感受性の生育障害が認められ,septumをもつ細胞の増加がみられた。pbp1^+とpbp2^+の二重破壊株では生育障害が顕著となるとともに,septumをもつ細胞はさらに増加し,multi-septumの細胞が出現した。この結果は,これらの変異株において細胞質分裂の遅延があることを示している。また,二重破壊株では無核の細胞の出現が認められ,有糸分裂における染色体の分配の障害と考えられた。これに対して,分裂酵母の野生株にpdp1^+を過剰発現させると増殖障害,細胞の球状化,septumをもつ細胞の増加,無核の細胞の出現などが見られた。これらの結果から,pbp1^+とpbp2^+は,細胞の生存と増殖,細胞形態の制御,細胞質分裂,染色体の分配などにおいて重要な役割を担うことがわかった。二重破壊株の表現型は,ヒトB'cDNAの導入によりレスキューされたことから,B'の機能が進化の過程で高度に保存されていることもわかった。次に,このようなB'の機能の分子的基盤を明らかにする目的でB'に結合する蛋白を酵母Two-Hybrid法により探索した。ヒト大脳皮質cDNAライブラリーより120万クローンをスクリーニングした結果,22個の陽性クローンが得られた。これらのクローンの解析からB'と細胞骨格系の制御因子との物理的相互作用が明らかになった。

プロテインホスファターゼ2A(PP2A)は,catalyst サブユニットCとadjusted サブユニットAとがcombinationしたヘテロ2 measuring body, あるいはこれに adjusting サブユニットのB,B', またはPR72が combined with した3 measuring body として existence する. Fission yeast をモデルbioticsとして用いてB'サブユニットのfunctional analysisを行った. Fission yeast より2 kinds of のB'ホモログを见いだし, その缝子(pbp1^+, pbp2^+) の波壊 strain を成した. pbp1^+ the remaining strain (Δpbp1) is the same, the low temperature is the high temperature sensitivity of the reproductive disorder, and the septum is the growth rate of the cells. pbp1^+とpbp2^+の Double broken strain では Fertility disorder が顕出となるとともに, septum をもつ cells は さら に嗗plus, multi-septum の cells が appear した.このRESULTSは,これらの変different strainsにおいてcytoplasmic divisionの遅yanがあることをshowしている.また, the appearance of the double-broken strain and the non-nucleated cells are recognized and recognized, and the obstacles to the distribution of the chromosomes and the distribution of the chromosomes are detected and tested.これに対して, wild strain of fission yeast にpdp1^+ を 剰発appears させるとproliferative disorder, cells Spheroidization of cells, increase of septum cells, appearance of anucleate cells, and appearance of septum cells.これらのRESULTから, pbp1^+とpbp2^+は, cell survival and proliferation, cell morphology The control, cytoplasmic division, and distribution of chromosomes are important. The phenotype of the double-broken strain, the introduction of the B'cDNA into the strain, and the introduction of itとから,B'のfunctional がevolution process でに に されていることもわかった. The basic structure of the functional molecule is the base of the molecule, and the purpose of the molecule is to combine it with the protein and explore the yeast Two-Hybrid method.ヒト大脳Cortex cDNAライブラリーより1.2 million クローンをAs a result of the test results, 22 positive test results were obtained.これらのクローンのanalyticsからB'とcytoskeleton systemのcontrolling factorsとのphysical interactionが明らかになった.

项目成果

Yasumasa Nishito: "Interconversion of Mn^<2+>-dependent and -independent protein phosphatase 2A from human erythrocytes : Role of Zn^<2+> and Fe^<2+> in protein phosphatase 2A"Journal of Biochemistry. 126. 632-638 (1999)

Yasumasa Nishito：“来自人红细胞的Mn ^ 2 依赖性和非依赖性蛋白磷酸酶2A的相互转化：Zn ^ 2 和Fe ^ 2 在蛋白磷酸酶2A中的作用”生物化学杂志。

Rintaro Inoue: "Studies on functions of the 63-kDa A- and 74-kDa B'δ-regulatory subunits in human erythrocyte protein phosphatase 2A : Dissociation and reassociation of the subunits"Journal of Biochemistry. 126. 1127-1135 (1999)

Rintaro Inoue：“人红细胞蛋白磷酸酶 2A 中 63-kDa A-和 74-kDa Bδ-调节亚基的功能研究：亚基的解离和重关联”《生物化学杂志》126。1127-1135 (1999)。