プロテインホスファターゼ2Aの74KDa調節サブユニットδの構造と機能

蛋白磷酸酶2A 74KDa调节亚基δ的结构和功能

• 批准号: 07680652
• 负责人: 碓井 裕史
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680652/
• 关键词: プロテインホスファターゼ2A; 蛋白質脱リン酸化; ヒト赤血球; 74kDaサブユニット; cDNAクローニング; 核移行シグナル; 組織分布; 解離・再構成

1.ヒト赤血球サイトゾルより精製した分子量180,000のプロテインホスファターゼ2Aは,34kDaの触媒サブユニットαと63および74kDaの調節サブユニットβ,δを各1分子ずつ含有する。74kDaδサブユニットの部分アミノ酸配列を決定し,ヒト大脳皮質および骨髄cDNAライブラリーよりδサブユニットのcDNAを単離した。このcDNAは570残基のアミノ酸より構成される分子量66,138の蛋白質をコードしており,大腸菌に発現させるとδサブユニット特異抗体と反応する約74kDaの蛋白質が検出された。推定される1次構造にはAキナーゼおよびCキナーゼによるリン酸化コンセンサス配列,核移行シグナル,プロリンリッチ領域,プロリン・グルタミンくり返し配列が認められた。δサブユニットのmRNAは約2.9kbで成熟ラットの調べた全ての組織(脳,心臓,肺,肝臓,脾臓,腎臓,腸,精巣,骨格筋)で検出された。:2.成熟ラットにおけるδサブユニットの組織分布をウエスタンブロット法で調べた。赤血球,脳,肺,精巣,副腎,心臓,脾臓,腎臓,肝臓のサイトゾルにδサブユニット特異抗体と反応する72kDa蛋白質が検出され,この内,脳における含量が最も多かった。骨格筋,腸ではほとんど検出されなかった。3.δサブユニットの機能をホロ酵素α_1β_1δ_1の解離,再構成により解析した。部分精製したα_1β_1δ_1をヘパリン-セファロースカラムを用いてα_1β_1とδに分離した。両者を0.4M塩化ナトリウム存在下で氷中で混和すると,ホロ酵素が再構成された。各種リン酸化基質に対するα_1β_1のホスファターゼ活性はδが結合することにより20-64%抑制され,α_1β_1およびα_1β_1δ_1の分子活性から推定されたδの機能を裏付けた。

1. The molecular weight is 180000, the molecular weight is 2A, the catalyst is the catalyst, the alpha, the 63, the 74kDa, the molecular weight, the β, the delta, the molecular weight. In the 74kDa δ section, the acid configuration is determined, and the cDNA is isolated from the bone, cDNA, and the skin. The protein with molecular weight 66138, the protein with molecular weight, the protein with molecular weight It is presumed that there is no significant difference between the two groups in the first time. This is due to the assumption that there is no significant difference between the two groups, and it is presumed that there is a problem in the configuration of the column, the nuclear transfer, the field, and the field. The whole tissue (heart, lung, liver, spleen, spleen, essence, bone and tendons) of the mature kidney of 2.9kb was detected by the method of mRNA. : 2. The mature system is very important. The distribution of the tissue is very important. Red blood cells, red blood cells, lung, sperm, accessory, heart, spleen, spleen, liver, liver, spleen, spleen, liver, liver Bones and tendons, please tell me how to get rid of your bones. 3. The enzyme α _ 1 β _ 1 δ _ 1 was dissociated by the enzyme α _ 1 β _ 1 δ _ 1, and then separated into an analytical enzyme. Some of the samples were separated from each other by the use of α _ 1 β _ 1 δ _ 1 δ _ 1. There is a mixture of enzymes in the lower temperature of 0.4 M, and the enzyme is then converted into a mixture of enzymes. The molecular activity of α _ 1 β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β _ 1, α _ 1, β

项目成果

Osamu Tanabe: "Molecular cloning of a 74-kDa regulatory subunit(B″ or δ)of human protein phosphatase 2A" FEBS Letters. 379. 107-111 (1996)

Osamu Tanabe：“人蛋白磷酸酶 2A 74 kDa 调节亚基（B”或 δ）的分子克隆”FEBS Letters 379. 107-111 (1996)。