tRNAと低分子RNAの新機能

tRNA和小RNA的新特征

• 批准号: 11155216
• 负责人: 井口 八郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11155216/
• 关键词: 低分子RNA; tRNA; tmRNA; thyA遺伝子; gidA; tRNA Thr_2; tRNA Leu_6; spf(spot42)遺伝子

大腸菌の低分子RNAの10Sa RNAはアラニンをチャージしてtRNAとして働く一方、メッセンジャーRNAとしても働くことからtmRNAとも呼ばれている。我々は10Sa RNAをコードするssrA遺伝子の欠失株が45℃で温度感受性を示すこと、10Sa RNAに依存する温度感受性の大腸菌ミュータントが分離できること、それらのミュータントはいろんな必須遺伝子に変異をもつものであるが、thymidylate synthase遺伝子の温度感受性株のthyAts12-20ミュータントは10Sa RNAに対して最も鮮明な表現型を示す。DNA塩基配列の解析からP228LとT216Aの二つの変異を持つことが判明した。このミュータントの10Sa RNAによる温度感受性の相補には、さらにsmall RNAをコードする遺伝子のspf(spot42)遺伝子の関与が必要であることが明らかになってきた。どのようにこのsmall RNAが働いて温度感受性を相補するのかについては引き続き研究している。大腸菌のtRNA Leu_6はタンパク質合成に際してはwobblingが可能な別のtRNA Leuが存在するので、non-essentialなtRNAの一つである。これまでの分子遺伝学的な研究により、このtRNAはgidAと命名されている細胞分裂に関与する遺伝子と機能的に関わりをもつことを明らかにした。大腸菌ではこのようなnon-essentialなtRNAはあと7種類存在する。これらのtRNA遺伝子に的を絞り、遺伝子破壊を試みている。tRNA Thr_2遺伝子の欠失株より野生型tRNA遺伝子で相補されるような温度感受性ミュータントの分離に成功し、温度感受性変異を調べてみると、脂肪酸代謝に関与する一つの遺伝子におちることが判明した。同様の実験をSer_2,Pro_1,Arg_4,Gly_1,Gln_2,Leu_1などについても開始している。

coli low molecular RNA 10Sa RNAはアラニンをチャージしてtRNAとして働く一,メッセンジャーRNAとしても働くことからtmRNAともHUばれている. I 々は10Sa RNA をコードするssrA 伝子の无码 が45℃でTemperature sensitivityをshowすこと、10Sa Isolation of RNA dependence and temperature sensitivity of Escherichia coli bacteria Thymidylate The temperature-sensitive strain of synthase is のthyAts12-20ミュータントは10Sa RNA and the most distinct phenotype is shown. The analysis of the DNA base arrangement is based on the analysis of P228L and T216A.このミュータントの10Sa RNAによるTemperature sensitivityのphase complementには、さらにsmall RNAをコードする伝子のspf (spot42) 伝子の关与が必であることが明らかになってきた.どのようにこのsmall RNAが働いて Temperature sensitivity をphase complement するのかについては cited き続き research している. Escherichia coli のtRNA Leu_6 はタンパクessence synthesis に间してはwobbling がpossible なdifferent tRNA Leu が existence するので, non-essential なtRNA の一つである.これまでのResearch on molecular geneticsにより、このtRNAはgidAとnamingされてThe function of cell division and function is the same as that of the cell division. There are 7 species of coliform bacteria non-essential non-tRNA はあと.これらのtRNA 缝子に的を twistり、缝子波壊をtrialみている. tRNA Isolation of Thr_2 genetically modified tRNA genetically modified wild-type tRNA genetically modified thermosensitive thermosensitiveに Success し, Temperature sensitivity change を べ て み る と, Fatty acid metabolism に switch and す る 一 つ の 伝子 に お ち る こ と が clarified し た.同様の実験をSer_2,Pro_1,Arg_4,Gly_1,Gln_2,Leu_1などについても开 startしている.

项目成果

S. Ohno et al.: "Co-expression of Yeast dmnes suppressor tRNA^<Tgr> and Tgresyl-tRNA synthetase in E_1 Coli possibility to expand the genetic code"J. Biochem.. 124. 1065-1068 (1998)

S. Ohno 等人：“在 E_1 Coli 中共表达酵母 dmnes 抑制因子 tRNA^<Tgr> 和 Tgresyl-tRNA 合成酶可扩展遗传密码”J.

T. Nakayashiki: "Novel Temperature-sensitive mutants of Eschanichia coli that are anable to grow in the absence of wild-type tRNA*"J. Bacteriol.. 180. 2931-2935 (1998)

T. Nakayashiki：“新的大肠杆菌温度敏感突变体能够在没有野生型 tRNA* 的情况下生长”J.

Chikanaga et al.: "Prediction of the promoters of all transfer RNA genes of Eschesichia Coli K12 by computational analysis"(発表予定).

Chikanaga 等人：“通过计算分析预测大肠杆菌 K12 所有转移 RNA 基因的启动子”（待提交）。