サルにおけるSDF-1発現系の作製と新たなCXCR4アンタゴニストの探索

猴SDF-1表达系统的创建并寻找新的CXCR4拮抗剂

• 批准号: 11161214
• 负责人: 田代 啓
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11161214/
• 关键词: AIDS; HIV; SDF-1; CXCR4; アンタゴニスト; サル; SHIV; 低分子量化合物

今年度は、新規低分子量SDF-1受容体アンタゴニスト候補分子10種類について、抗HIV活性を持つかどうかを、in vitro HIV/SHIV感染系で検討し、分子量約900のONO-4007が抗HIV/SHIV活性を持つことを同定した。抗HIV活性の背後にある分子メカニズムとして、低分子量化合物ONO-4007によるマウスT細胞株EL-4のin vitro CXCR4 down modulationを、human SDF-1-Igキメラタンパク質を用いるFACS解析で検討し、down modulationをみとめた。in vitro感染実験系での抗HIV/SHIV活性を調べるため、X4株であるNL432、IIIBや、R5X4株である89.6Pを、低分子量化合物ONO-4007またはコントロールのSDF-1タンパク質存在下、非存在下にヒトT細胞株(MT4,M8166,H9)に感染させ、経時的に培養液中逆転写酵素活性を測定し、低分子量化合物ONO-4007に用量依存的に抗HIV/SHIV活性をみとめた。今後、京大ウイルス研究所・速水博士らと共同で、大動物サルを用いて、低分子量化合物ONO-4007の抗SHIV活性がin vitroで発揮されるかどうかを検討するため予備的に、低分子量化合物ONO-4007のin vitroにおけるサルの抹消血球細胞における抗HIV/SHIV活性を検討し、用量依存的な抗HIV/SHIV活性をみとめた。また、アデノウイルスベクターを用いたサルにおけるSDF-1過剰産生系を作製した。

Our は ", the new rules by low molecular weight SDF - 1 let body ア ン タ ゴ ニ ス ト alternate molecules 10 kinds に つ い て, anti-hiv activity を つ か ど う か を, in vitro HIV/SHIV infection department で beg し 検, molecular weight of about 900 の が ONO - 4007 HIV/SHIV active を hold つ こ と を with fixed し た. The にある molecule メカニズムと て て behind the anti-hiv activity <s:1>, the low molecular weight compound ONO-4007による ウス ウスT cell line EL-4 <e:1> in vitro CXCR4 down modulationを, human SDF - 1 - Ig キ メ ラ タ ン パ ク qualitative を with い る both FACS parsing で beg し 検, down modulation を み と め た. in Department of vitro infection be 験 で の HIV/SHIV activity を adjustment べ る た め, X4 で あ る NL432, IIIB や, R5X4 で あ る ONO - 4007 89.6 P を, low molecular weight compounds ま た は コ ン ト ロ ー ル の SDF - 1 タ ン パ ク mass, in the presence of the presence of に ヒ ト T cell lines (MT4, M8 166,H9)に infection させ, determination of reverse 転 enzyme activity を in に culture medium over time に, dose-dependent に anti-HIV /SHIV activity をみとめた of low molecular weight compound ONO-4007に. In the future, Beijing ウ イ ル ス institute, Dr Speed water ら と で together, the big animal サ ル を with い て resistance, low molecular weight compounds ONO - 4007 の が SHIV activity in vitro で 発 swing さ れ る か ど う か を beg す 検 る た め reserve に, ONO - 4007 の in low molecular weight compounds Vitro に お け る サ ル の effacement に blood cells お け る anti-hiv activity/SHIV を beg し 検, dosage dependent な HIV/SHIV active を み と め た. ま た, ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い た サ ル に お け る SDF - 1 before turning the produce department を cropping し た.

项目成果

Revy,P., et al.: "A Syndrome Involving Intrauterine Growth Retardation, Microcephaly, Cerebellar Hypoplasia. B Lymphocyte Deficiency, and Progressive Pancytopenia"Pediatrics. 105. 22476-22483 (2000)

Revy，P.，等人：“涉及子宫内生长迟缓、小头畸形、小脑发育不全的综合征。B 淋巴细胞缺乏和进行性全血细胞减少症”儿科。

Moriya,C., et al.: "Large quantity production with extreme convenience of human SDF-1α and SDF-1β by a Sendai virus vector"FEBS Lett.. 425. 105-111 (1998)

Moriya, C., et al.：“通过仙台病毒载体极其方便地大量生产人类 SDF-1α 和 SDF-1β” FEBS Lett.. 425. 105-111 (1998)

Winkler,C., et al.: "Genetic Restriction of AIDS Pathogenesis by an SDF-1 Chemokine Gene Variant"Science. 279. 389-393 (1998)

Winkler,C. 等人：“SDF-1 趋化因子基因变体对 AIDS 发病机制的遗传限制”科学。