Charakterisierung und Expressionsanalyse einer spezifischen Protease, die für die Prozessierung der B-Untereinheit der V-ATPase von Mesembryanthemum crystallinum L. verantwortlich ist
负责加工 Mesembryanthemum crystallinum L 的 V-ATP 酶 B 亚基的特定蛋白酶的表征和表达分析
基本信息
- 批准号:5298254
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2000
- 资助国家:德国
- 起止时间:1999-12-31 至 2002-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Beim Übergang von der C3-Photosynthese zum CAM erscheint im Tonoplasten von Mesembryanthemum crystallinum eine 32 kDa-Polypeptid (Di), welches ein Bestandteil des V-ATPase-Holoenzyms ist. Es ist bereits bekannt, daß Di der C-Terminus der B-Untereinheit der V-ATPase ist, und daß eine Protease an der Prozessierung der B-Untereinheit beteiligt ist. Im Rahmen des Projektes soll überprüft werden, ob die Spaltung der B-Untereinheit durch die Protease in vitro zu einem Aktivitätsverlust der V-ATPase führt, oder ob die Aktivität erhalten bleibt, und die Spaltung zu einer V-ATPase mit veränderten Eigenschaften führt. Die Induzierbarkeit der Protease durch verschiedene Streßbedingungen und im Verlauf der Entwicklung von M. crystallinum soll auf Transkript- und Proteinebene analysiert werden. Es soll untersucht werden, ob die Proteolyse von V-ATPase-Untereinheiten ein allgemeines Prinzip der Regulation der Aktivität der VATPase in Pflanzen darstellt. Dazu soll geprüft werden, ob die aus M. crystallinum gereinigte Protease in der Lage ist, VATPase-Untereinheiten aus anderen Organismen zu prozessieren, oder ob strukturell ähnliche Proteasen, die zur Spaltung von VATPase-UE und zum Auftreten stabiler Zwischenstufen beim Turnover der V-ATPase führen, unter bestimmten Streßbedingungen in anderen Organismen induziert werden.
通过C3-光合作用使CAM在中胚细胞膜上形成32 kDa的多肽(Di),从而获得V-ATPase-全酶的最佳活性。这就需要在V-ATP酶的B-非酶切C-末端和蛋白酶的B-非酶切过程中进行酶切。在韦尔登中,通过体外蛋白酶对V-ATP酶活性的检测,或通过活性检测,以及通过特征性检测对V-ATP酶的检测,获得了B细胞的分离。蛋白酶的工业化生产是通过对M.在韦尔登进行转录和蛋白质成分分析。韦尔登酶解是调节葡萄糖腺苷三磷酸酶活性的一般原理。你可以从M那里得到韦尔登。在拉格酶中加入蛋白酶,使其从其他有机体中分离出来,或者通过蛋白酶的结构,使VATPase-UE的分离和增强稳定性,从而使V-ATP酶的转化率提高,从而使其他有机体中的VATPase-Untereinheiten在韦尔登中的转化率提高。
项目成果
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